[发明专利]疫苗组合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种核苷酸片段，所述核苷酸片段由以下片段顺序连接组成：

对应于牛传染性鼻气管炎病毒Cooper株gB蛋白基因202-357位核苷酸片段、955-1320位核苷酸片段、1423-1509位核苷酸片段、2230-2289位核苷酸片段，上述四段核苷酸片段之间用柔性linker连接；所述牛传染性鼻气管炎病毒Cooper株gB蛋白基因登录号为KU198480.1；所述核苷酸片段编码序列表SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的蛋白。

2.一种由权利要求1所述核苷酸片段编码的牛传染性鼻气管炎病毒gB蛋白片段；所述gB蛋白片段为序列表SEQ ID NO：2所示的氨基酸片段。

3.一种牛传染性鼻气管炎病毒gB-gD蛋白，其中，所述gB-gD蛋白包括根据权利要求2所述的gB蛋白片段以及gD蛋白；所述gB蛋白片段与gD蛋白比例为1：1；所述gB蛋白片段与所述gD蛋白串联表达；所述gD蛋白氨基酸片段为序列表SEQ ID NO：4所示的氨基酸片段。

4.一种牛传染性鼻气管炎病毒亚单位疫苗组合物，其中，所述亚单位疫苗组合物包含免疫量的根据权利要求2所述的gB蛋白片段，以及药学上可接受的载体。

5.根据权利要求4所述的疫苗组合物，其中，所述gB蛋白片段含量为25-100μg/ml。

6.一种牛传染性鼻气管炎病毒亚单位疫苗组合物，其中，所述亚单位疫苗组合物包含免疫量的根据权利要求3所述的gB-gD蛋白以及药学上可接受的载体；所述gB蛋白片段与gD蛋白比例为1：1；所述gB蛋白片段与gD蛋白串联表达；所述gD蛋白如SEQ ID NO：4所示，所述gB蛋白片段含量为25-50μg/ml。

7.根据权利要求4~6任一项所述的疫苗组合物，其中，所述的药学上可接受的载体包括佐剂，

所述佐剂包括：（1）铝胶佐剂、皂苷、阿夫立定、DDA；（2）油包水乳剂、水包油乳剂、水包油包水乳剂；或（3）丙烯酸或甲基丙烯酸的聚合物、顺丁烯二酸酐和链烯基衍生物的共聚物；以及RIBI佐剂系统、Block co-polymer、SAF-M、单磷酰脂质A、Avridine脂质-胺佐剂、大肠杆菌不耐热肠毒素、霍乱毒素、IMS 1314、胞壁酰二肽、Gel佐剂中的一种或几种；

所述佐剂的浓度范围是从5％到50％V/V。

8.根据权利要求7所述的疫苗组合物，其中，所述佐剂为卡波姆；或所述佐剂为206佐剂。

9.根据权利要求8所述的疫苗组合物，其中，所述佐剂为卡波姆974P、934P和971P。

10.根据权利要求7所述的疫苗组合物，其中，所述佐剂的浓度为50％V/V。

11.根据权利要求4~10所述的疫苗组合物在制备预防牛传染性鼻气管炎病毒相关疾病或由牛传染性鼻气管炎病毒导致的感染的药物中的应用。