[发明专利]用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒及使用方法有效

专利信息
申请号: 201610770861.7 申请日: 2016-08-31
公开(公告)号: CN106290919B 公开(公告)日: 2018-03-27
发明(设计)人: 杨阔;马鹏德;杜娥;刘通;王嘉南;王林;丁浩;陈赛鹏;徐勇 申请(专利权)人: 天津市泌尿外科研究所
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N33/574
代理公司: 天津市宗欣专利商标代理有限公司12103 代理人: 孙乔乔
地址: 300211*** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 用于 检测 去势 抵抗性 前列腺癌 elisa 试剂盒 使用方法
【权利要求书】:

1.ACTG1抗体在制备用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒中的用途,其特征在于:所述试剂盒包括ACTG1抗体,采用双抗体夹心ELISA方法检测血清中ACTG1的含量来检测去势抵抗性前列腺癌,判定阈值为78174.25mg/ml~ 95546.31 mg/ml。

2.根据权利要求1所述的ACTG1抗体在制备用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒中的用途,其特征在于:所述试剂盒包括包被ACTG1抗体的ELISA 酶标板、标准品、标准品&样品稀释液、生物素标记的ACTG1抗体、亲和素标记的辣根过氧化物酶、洗涤液、底物溶液、反应终止液、覆膜中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的ACTG1抗体在制备用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒中的用途,其特征在于:所述用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒的使用方法,包括以下步骤:

Ⅰ.采集前列腺癌患者全血样品,离心取上清;

Ⅱ.分别设空白孔、标准孔、待测样品孔,空白孔加标准品&样品稀释液,余孔分别加标准品或待测样品,混匀;酶标板加覆膜,孵育;

Ⅲ.弃去孔内液体,甩干;每孔加入生物素标记的ACTG1抗体,酶标板加覆膜,温育;

Ⅳ.弃去孔内液体,甩干,洗涤酶标板,再甩干;

Ⅴ.每孔加入亲和素标记的辣根过氧化物酶,酶标板加覆膜,温育;

Ⅵ. 弃去孔内液体,甩干,洗涤酶标板,再甩干;

Ⅶ.每孔加入底物溶液,酶标板加覆膜,避光孵育;

Ⅷ.每孔加入反应终止液;

Ⅸ. 450nm波长下测量各孔的OD值;

Ⅹ.根据标准品的OD值计算血清样本ACTG1的检测值,并判断其与判定阈值的大小关系,所述判定阈值为78174.25mg/ml~ 95546.31 mg/ml。

4.根据权利要求3所述的ACTG1抗体在制备用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒中的用途,其特征在于:所述步骤Ⅰ中全血样品于室温放置0~4小时或0~8℃过夜后于500~1500×g离心10~30分钟。

5.根据权利要求3所述的ACTG1抗体在制备用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒中的用途,其特征在于:所述步骤Ⅳ中洗涤酶标板1~5次,每次浸泡1-2分钟;步骤Ⅵ中洗涤酶标板3~7次,每次浸泡1-2分钟。

6.根据权利要求5所述的ACTG1抗体在制备用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒中的用途,其特征在于:所述步骤Ⅳ中洗涤酶标板3次,每次浸泡1.5分钟;步骤Ⅵ中洗涤酶标板5次,每次浸泡1.5分钟。

7.根据权利要求3所述的ACTG1抗体在制备用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒中的用途,其特征在于:所述判定阈值为86860.28mg/ml。

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