[发明专利]用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒及使用方法有效
申请号: | 201610770861.7 | 申请日: | 2016-08-31 |
公开(公告)号: | CN106290919B | 公开(公告)日: | 2018-03-27 |
发明(设计)人: | 杨阔;马鹏德;杜娥;刘通;王嘉南;王林;丁浩;陈赛鹏;徐勇 | 申请(专利权)人: | 天津市泌尿外科研究所 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/574 |
代理公司: | 天津市宗欣专利商标代理有限公司12103 | 代理人: | 孙乔乔 |
地址: | 300211*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 去势 抵抗性 前列腺癌 elisa 试剂盒 使用方法 | ||
1.ACTG1抗体在制备用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒中的用途,其特征在于:所述试剂盒包括ACTG1抗体,采用双抗体夹心ELISA方法检测血清中ACTG1的含量来检测去势抵抗性前列腺癌,判定阈值为78174.25mg/ml~ 95546.31 mg/ml。
2.根据权利要求1所述的ACTG1抗体在制备用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒中的用途,其特征在于:所述试剂盒包括包被ACTG1抗体的ELISA 酶标板、标准品、标准品&样品稀释液、生物素标记的ACTG1抗体、亲和素标记的辣根过氧化物酶、洗涤液、底物溶液、反应终止液、覆膜中的一种或几种。
3.根据权利要求1所述的ACTG1抗体在制备用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒中的用途,其特征在于:所述用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒的使用方法,包括以下步骤:
Ⅰ.采集前列腺癌患者全血样品,离心取上清;
Ⅱ.分别设空白孔、标准孔、待测样品孔,空白孔加标准品&样品稀释液,余孔分别加标准品或待测样品,混匀;酶标板加覆膜,孵育;
Ⅲ.弃去孔内液体,甩干;每孔加入生物素标记的ACTG1抗体,酶标板加覆膜,温育;
Ⅳ.弃去孔内液体,甩干,洗涤酶标板,再甩干;
Ⅴ.每孔加入亲和素标记的辣根过氧化物酶,酶标板加覆膜,温育;
Ⅵ. 弃去孔内液体,甩干,洗涤酶标板,再甩干;
Ⅶ.每孔加入底物溶液,酶标板加覆膜,避光孵育;
Ⅷ.每孔加入反应终止液;
Ⅸ. 450nm波长下测量各孔的OD值;
Ⅹ.根据标准品的OD值计算血清样本ACTG1的检测值,并判断其与判定阈值的大小关系,所述判定阈值为78174.25mg/ml~ 95546.31 mg/ml。
4.根据权利要求3所述的ACTG1抗体在制备用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒中的用途,其特征在于:所述步骤Ⅰ中全血样品于室温放置0~4小时或0~8℃过夜后于500~1500×g离心10~30分钟。
5.根据权利要求3所述的ACTG1抗体在制备用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒中的用途,其特征在于:所述步骤Ⅳ中洗涤酶标板1~5次,每次浸泡1-2分钟;步骤Ⅵ中洗涤酶标板3~7次,每次浸泡1-2分钟。
6.根据权利要求5所述的ACTG1抗体在制备用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒中的用途,其特征在于:所述步骤Ⅳ中洗涤酶标板3次,每次浸泡1.5分钟;步骤Ⅵ中洗涤酶标板5次,每次浸泡1.5分钟。
7.根据权利要求3所述的ACTG1抗体在制备用于检测去势抵抗性前列腺癌的ELISA试剂盒中的用途,其特征在于:所述判定阈值为86860.28mg/ml。
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