[发明专利]铁皮石斛优质种苗自然光培养一次成苗快速繁殖方法

说明书

本发明公开了铁皮石斛优质种苗自然光培养一次成苗快速繁殖方法，主要由6个步骤组成。依次为准备铁皮石斛材料，建造全自然光培养室，制作种子悬浮液，无菌播种，一次成苗培养和试管苗的移栽。其中一次成苗培养又进一步分为原球茎诱导培养，小苗培养和大苗培养三个阶段。还包括上述快速繁殖方法中使用的一次成苗培养基。本发明可以一次成苗，不需转接人工，加上采用全自然光培养室，根据不同生长阶段对光的需求不同而移动培养的位置，生产出来的种苗健壮易成活，移栽前不需要经过专门的炼苗处理，可直接出瓶移栽，显著降低了生产成本。利用高萌发率的种子、营养丰富的培养基和全自然光培养室可以实现铁皮石斛种苗一次成苗的大规模生产。

技术领域

本发明属于通过组织培养技术的植物再生技术，具体涉及一种铁皮石斛优质种苗自然光培养一次成苗快速繁殖方法，以及所采用的一次成苗培养基。

背景技术

铁皮石斛是兰科石斛属附生植物，自古以来就是公认的名贵中草药。野生铁皮石斛生长发育所需的环境条件极为苛刻，生长缓慢，繁殖率极低，而人为掠夺性采挖已导至野生铁皮石斛资源近于枯竭。目前的繁殖方法主要分两类，一类是组织快繁。组培苗栽培前应先进行14～21天的炼苗，具体措施是将组培苗移至炼苗房，使其在开放变化的环境中逐渐适应自然环境，待组培苗叶色浓绿时即可出瓶种植。出瓶前先将瓶盖打开，让瓶苗在室外空气中放置2～3天，让其适应自然温湿度。然后进行洗苗，洗苗时将带有培养基的幼苗轻轻取出，置于盆中清洗，污染苗和裸根苗或少根苗应分开放置。组培苗先用自来水清洗，主要是应洗掉琼脂，以免琼脂发霉引起烂根，而后再用清水漂洗一下。洗苗时最好根据苗的大小和优劣同步进行分级，以便栽培、管理，提高组培苗的成活率并使其生长整齐。另一类是分株扦插，主要原理是分株时选择1年生或2年生、色泽嫩绿、健壮、萌发多、根系发达及无病虫害的植株作种株，剪去枯枝、断枝、老枝及过长的须根，将株丛切开，分成小丛，每丛带有叶的茎株5～7根，即可种植。

组培繁育铁皮石斛种苗的技术虽然已经获得成功，但铁皮石斛种苗普遍存在培养周期长、污染率高、操作复杂、生产成本较高的等问题，从而制约着铁皮石斛产业的快速发展。如公开号为CN101564008A、名称为“一种铁皮石斛无菌苗的无激素培养及快速繁殖方法”的国内发明专利公开了一种铁皮石斛无菌苗的无激素培养及快速繁殖方法，内容包括铁皮石斛种子的无菌萌发，原球茎及幼苗的形成与保存，无菌苗的生根、增殖和壮苗培养，无菌苗的练苗和移栽等过程。但该技术存在的缺点是原球茎及幼苗的诱导过程涉及红光、绿光、无光、黄光和蓝光的使用，因此过程非常复杂，而且诱导的过程很难控制，不利于于大规模工业化生产应用

发明内容

本发明要解决的技术问题是铁皮石斛种苗普遍存在的培养周期长、污染率高、操作复杂、生产成本较高的问题等问题，本发明通过利用高萌发率的种子、营养丰富的培养基、全自然光培养室实现铁皮石斛种苗一次成苗大规模生产，具有低成本，高效率的特点，是种苗的规模化生产的高新生物技术，可促进铁皮石斛产业的可持续发展。

为解决上述问题，本发明提出的技术方案是一种铁皮石斛优质种苗自然光培养一次成苗快速繁殖方法，包含以下步骤：

(1)准备铁皮石斛材料；

(2)建造全自然光培养室

使用透光材料，并配备遮阳系统、降温设备和培养架，通过遮阳系统确保培养室内顶层培养架的光照强度为3000～5000Lux，光照强度随着培养架的层数下移而降低，底层培养架的光照强度为100～1000Lux，降温设备可将玻璃培养室的温度控制在20～30℃，培养架长度可根据培养室的大小而定；

(3)制作种子悬浮液