[发明专利]白血病疾病模型及其构建方法

说明书

技术领域

本申请涉及疾病模型的构建，特别是白血病疾病模型及其构建方法。

背景技术

白血病是一种造血系统恶性增殖性疾病，通常指因白血病细胞大量增殖、累积所引起的一类疾病。由于白血病分型和预后分层的复杂性，所以为了获得更好的治疗效力，对白血病的研究势在必行。然而，体外培养的白血病细胞的生物学特征与体内的白血病细胞生物学特征通常存在一定的差异，且在人体上进行实验会导致极高的成本和风险，所以，其对应的动物模型是对白血病深入研究的重要环节。

小鼠是白血病研究中常用的理想动物模型，人类血液系统的髓系、淋巴系等恶性肿瘤均可获得相应的小鼠模型，但是现有的人源化小鼠模型依然存在构建成功率低、临床相关性不高等缺陷。

发明内容

本申请提供了白血病疾病模型、其构建方法以及通过该模型对候选药物效力进行评估的方法和系统。本申请所提供的疾病模型构建方法直接建立患者来源的移植瘤疾病模型，具有很高的成功率。此外，根据本申请的方法建立的疾病模型具有很高的临床相关性。

一方面，本申请提供了制备白血病人源化疾病模型的方法，所述方法包括：a)将来自白血病患者的骨髓样本制备为细胞悬液，并使用单核细胞分离液来对所述细胞悬液进行离心分离；b)获取包含白血病细胞的细胞层并制备白血病细胞悬液；c)判断所述白血病是否为T细胞型白血病；对于非T细胞型白血病，去除由b)获得的所述白血病细胞悬液中的T细胞，得到待接种的白血病细胞悬液，并使所述待接种的白血病细胞悬液中白血病细胞的终密度为2x10⁷/ml至5x10⁷/ml；对于T细胞型白血病，从由b)获得的所述白血病细胞悬液制备待接种的白血病细胞悬液，其中白血病细胞的终密度为2x10⁷/ml至5x10⁷/ml；d)根据所述患者的白血病类型选择适当的免疫缺陷型小鼠，并对所述免疫缺陷型小鼠进行放射性处理；以及e)将由c)获得的所述待接种的白血病细胞悬液注射接种到d)所述经放射性处理的免疫缺陷型小鼠中。

在某些实施方式中，所述患者骨髓样本中白血病细胞的含量为至少90％。

在某些实施方式中，所述单核细胞分离液为Ficoll，且所述离心分离为密度梯度离心分离。

在某些实施方式中，使用RPMI细胞培养基制备白血病细胞悬液。

在某些实施方式中，被去除的所述T细胞为CD3阳性T细胞。例如，可通过使用包含CD3抗体的磁珠来去除所述CD3阳性T细胞。在某些实施方式中，可使用高磁场来去除所述CD3阳性T细胞。

在某些实施方式中，所述白血病类型为急性淋巴细胞性白血病，且所述免疫缺陷型小鼠为NSG小鼠。对于该NSG小鼠，所述放射性处理为X射线辐射，且辐射剂量为200cGy至300cGy。

在某些实施方式中，所述白血病类型为急性髓性白血病，且所述免疫缺陷型小鼠为MISTRG小鼠。对于该MISTRG小鼠，所述放射性处理为X射线辐射，且辐射剂量为550cGy至650cGy。

在某些实施方式中，在注射所述白血病细胞悬液之前的12-24小时内对所述免疫缺陷型小鼠进行所述放射性处理。

在某些实施方式中，所述免疫缺陷型小鼠的年龄为5-7周。

在某些实施方式中，在注射接种所述基本不含T细胞的白血病细胞悬液之前对所述免疫缺陷型小鼠进行红外灯照射及加热。

在某些实施方式中，所述方法还包括监测来自所述患者的白血病细胞在所述小鼠体内的生长情况。例如，可通过监测经注射接种的所述小鼠外周血中huCD45⁺、huCD19⁺、huCD3⁺、和/或huCD33⁺细胞的比例来监测来自所述患者的白血病细胞在所述小鼠体内的生长情况。