[发明专利]一种布洛芬中遗传毒性杂质对甲苯磺酸乙酯的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种通过气相色谱质谱联用仪测定布洛芬中遗传毒性杂质对甲苯磺酸乙酯的方法。

背景技术

布洛芬是一种非甾体类抗炎药，其化学名称：2-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸，分子式为：C₁₃H₁₈O₂，分子量为：206.28，结构式为：

非甾体抗炎药(Nonsteroidal Antiinflammatory Drugs，NSAIDs)是一类不含有甾体结构的抗炎药，通过抑制前列腺素的合成，发挥其解热、镇痛、消炎作用，在临床上广泛用于骨关节炎、类风湿性关节炎、多种发热和各种疼痛症状的缓解。目前NSAIDs是全球使用最多的药物种类之一，世界大约每天有3000万人在使用。布洛芬作为非甾体抗炎药能刺激人体和实验动物的细胞免疫功能，增加自然杀伤细胞的活力，加速病原微生物的清除，可明显改善免疫功能，提高抗感染能力，因而具有抗炎解热功能。布洛芬1966年首次在英国批准上市，1974年在美国上市。1983年，作为第一个非甾体抗炎药在英国被批准为非处方药，次年被美国批准为非处方药。1985年，全球布洛芬的使用者超过了一亿，具有良好的疗效和安全性记录。

2009年美国FDA上市布洛芬注射液Caldolor，用于经静脉内输注给药缓解轻至中度疼痛和作为阿片类止痛药物的附加用药缓解中至重度疼痛以及治疗发热，该剂型可为不能、不适或不便使用口服药物患者提供一种新的疼痛缓解或发热治疗的选择。因当前市场上无注射级布洛芬原料，用于布洛芬注射液的原料需进行精制，使其可以满足注射剂生产的要求。根据布洛芬的合成工艺可知，布洛芬合成过程中使用了对甲苯磺酸，其残留可能与精制过程中使用的乙醇反应生成对甲苯磺酸乙酯。欧洲药品审评委员会(EMEA)相关技术文件显示，甲磺酸烷基酯杂质可能具有潜在的遗传毒性，毒理学担忧阈值(TTC)估计值是1.5μg/人/日。因此，需建立高灵敏度分析方法严格控制该类杂质。但现有技术中少有关于布洛芬中对甲苯磺酸乙酯的测定方法的相关研究。

发明内容

本发明的目的是提供一种气相色谱质谱联用的方法，检测布洛芬中遗传毒性杂质对甲苯磺酸乙酯，以控制布洛芬原料质量。

本发明的技术方案如下：

1)色谱条件：

气相色谱条件：

色谱柱：5％苯基-亚芳基和95％二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱；

柱箱温度：50℃～300℃；

流速：0.5～1.5mL/min；

进样口：200～300℃；

进样量：0.1～2μl；

质谱条件：

检测器：质谱检测器：

离子源：EI源，选择离子扫描模式；

离子源温度：250～300℃；

传输线温度：250～300℃。

2)供试品溶液的配制取布洛芬样品适量，置量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

3)对照品线性溶液的配制取对甲苯磺酸乙酯对照品适量，置量瓶中，加溶剂溶解并稀释制成对照品储备液；分别精密量取适量，加溶剂定量稀释制成一系列不同浓度的溶液，作为对照品线性溶液。

4)测定精密量取对照品线性溶液，分别注入气质色谱仪，记录色谱图，以对照品线性溶液浓度与相应的峰面积计算线性回归方程。精密量取供试品溶液，注入气质色谱仪，记录色谱图，按线性回归方程计算对苯甲磺酸乙酯含量。

步骤1)气相色谱条件中所述色谱柱为TG-5MS，长度为30m，口径为0.32mm，膜厚为0.25μm；所述柱箱温度采用程序升温，初始温度50℃，保持2min，以10℃/min速率升温到200℃，再以30℃/min速率升温到300℃，保持10min；所述进样口温度优选为280℃，进样方式为不分流进样，不分流时间1min；柱流速优选为1.0ml/min；所述检测方法色谱条件中进样量为1μl。

步骤1)质谱条件中所述选择离子为m/z：91、92、155；离子源温度优选为280℃，传输线温度优选为280℃。

进一步地，步骤2)和3)所述溶剂选自丙酮、正己烷或其混合。

进一步地，步骤3)所述对照品线性溶液浓度为20～400ng/ml。

进一步地，步骤3)所述对照品线性溶液浓度选自20、40、50、80、100、160、200、300、400ng/ml。

进一步地，步骤3)所述对照品线性溶液浓度为20、40、80、160、300ng/ml。