[发明专利]细胞‑抗体复合物及其制备方法

说明书

技术领域

本申请涉及医学领域，具体地，本申请提供了用于治疗疾病的细胞-抗体复合物以及其制备方法。

发明背景

癌症已经成为人类第一位致死性病因。癌症的标准疗法包括手术、化疗、放疗。然而，这些方法毒副作用大、预后较差、复发率高，因此总体疗效并不理想。

近年来，癌症免疫疗法成为科研人员的新宠。癌症免疫疗法，也可称为“生物疗法”、“细胞疗法”或“自体血活化疗法”等，本质上来说就是试图通过增强人体本身的免疫系统，以清除体内的肿瘤细胞。目前癌症免疫疗法主要有四大类：过继细胞疗法、免疫检查点阻断剂、非特异性免疫激活剂与癌症疫苗，但这些方法治疗癌症的效果并不理想。在感染性疾病治疗方面，例如病毒感染性疾病，也已经尝试利用生物免疫疗法治疗，但其疗效并不确切。

发明概述

第一方面，提供了细胞-抗体复合物，其包含免疫细胞以及位于所述免疫细胞表面的抗体或其抗原结合片段。

在一些实施方案中，免疫细胞为T细胞、NK细胞、CIK细胞等，优选为T淋巴细胞，更优选为CD8+T淋巴细胞。

在一些实施方案中，所述免疫细胞为使用还原剂处理过的细胞，优选地，所述还原剂选自二硫苏糖醇(DTT)、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)、β-巯基乙醇和2-巯基乙醇胺(2-MEA)。

在一些实施方案中，抗体或其抗原结合片段能够特异性结合至疾病或病症相关抗原，所述疾病或病症相关抗原例如可以为肿瘤相关的抗原或病原体特异性的细胞表面抗原。在一具体的实施方案中，所述疾病或病症相关抗原为肿瘤相关抗原，更优选为肿瘤细胞表面抗原。优选地，所述肿瘤相关抗原选自以下的一种或多种：CD20、HER2、EGFR、CD33、CD52、VEGF、CTLA-4、CD30、RANKL、HER2、VEGF-R2、Her3、A33抗原、CD5、CD19、CD22、CD23(IgE受体)、CA242抗原、5T4、VEGFR-1、CD33、CD37、CD40、CD44、CD51、CD52、CD56、CD74、CD80、CD152、CD200、CD221、CCR4、NPC-1C、波形蛋白、胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)、甲胎蛋白、癌胚抗原(CEA)、整合素α_vβ₃、整合素α₅β₁、成纤维细胞活化蛋白、FAP-α、TAG-72、MUC1、MUC16、前列腺特异性膜抗原(PMSA)、EGP40泛癌抗原、糖蛋白EpCAM、程序性死亡-1、肝再生磷酸酶3(PRL-3)、Lewis-Y抗原、GD2、磷脂酰肌醇聚糖-3(GPC3)和间皮素。在另一具体实施方案中，所述疾病或病症相关抗原为病原体特异性细胞表面抗原，所述病原体例如为HIV、HCV、HBV、CMV和EB病毒。

在一些实施方案中，上述细胞-抗体复合物是通过基因工程方法或化学方法制备的。优选地，所述细胞-抗体复合物通过化学偶联方法制备。

在一些实施方案中，所述抗体是用能够提供马来酰亚胺基团的试剂修饰的抗体，优选地，所述试剂选自4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐(sulfo-SMCC)、琥珀酰亚胺基3-[溴代乙酰基氨基]丙酯、N-琥珀酰亚胺基碘代乙酯、N-琥珀酰亚胺基[4-碘代乙酰基]氨基苯甲酸酯、琥珀酰亚胺基4-[p-马来酰亚胺苯基]丁酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺-(聚乙二醇)2-马来酰亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺-(聚乙二醇)4-马来酰亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺-(聚乙二醇)6-马来酰亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺-(聚乙二醇)8-马来酰亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺-(聚乙二醇)12-马来酰亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺-(聚乙二醇)24-马来酰亚胺、琥珀酰亚胺基-6-[(β-马来酰亚胺丙酰胺基)]己酯、4-琥珀酰亚胺基氧羰基-甲基-α[2-吡啶基二硫]甲苯、N-琥珀酰亚胺基3-[2-吡啶基二硫]丙酯、N-[ε-马来酰亚胺乙酰基氧]硫代琥珀酰亚胺酯、N-[γ-马来酰亚胺丁酰氧]琥珀酰亚胺酯、N-[κ-马来酰亚胺十一酰氧]-硫代琥珀酰亚胺酯、硫代琥珀酰亚胺基-6-[α-甲基-α-(2-吡啶基二硫)甲苯酰胺基]己酯、硫代琥珀酰亚胺基6-[3’-(2-吡啶基二硫)-丙酰胺基]己酯、m-马来酰亚胺苯甲酰-N-羟基硫代琥珀酰亚胺酯、硫代琥珀酰亚胺基[4-碘代乙酰基]氨基苯甲酸酯、硫代琥珀酰亚胺基4-[N-马来酰亚胺甲基]-环己烷-1-羧化物和硫代琥珀酰亚胺基4-[p-马来酰亚胺苯基]丁酯。

第二方面，提供了制备本文公开的细胞-抗体复合物的方法，其包括以下步骤：