[发明专利]两种大环内酯类化合物及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种大环内酯类化合物，其特征在于所述化合物的结构式为:

。

2.如权利要求1所述的大环内酯类化合物的制备方法，其特征在于所述化合物的制备方法是将冰城链霉菌突变菌株Streptomyces bingchenggensis BC-120-4依次经斜面培养和种子培养，再发酵后分离纯化。

3.根据权利要求2所述的大环内酯类化合物的制备方法，其特征在于所述的斜面培养是用去离子水配制斜面培养基，灭菌，接菌后置于28℃培养箱中，培养8~9天，将培养得到的孢子用无菌水配置成10⁷~10⁸ c.f.u. ml^-1的孢子悬液备用；

其中，所述斜面培养基组成（g/L）：葡萄糖10~12，麦芽糖3~4，酵母抽提粉3~4，K₂HPO₄·3H₂O 0.5~0.6，MgSO₄·7H₂O 0.5~0.6，NaCl 0.5~0.6，KNO₃1.0~1.2，琼脂粉20~25，pH值为7.0~7.2。

4.根据权利要求2所述的大环内酯类化合物的制备方法，其特征在于所述的种子培养是用蒸馏水配制种子培养基，灭菌，取斜面培养所得10⁷~10⁸ c.f.u. ml^-1孢子悬液接种于种子培养基中，置于旋转式摇床，在28℃条件下培养46~52 h；

其中，所述种子培养基组成（g/L）：葡萄糖5~6，麦芽糊精5~6，可溶性淀粉1.0~1.2，酵母粉5~6，牛肉膏1.0~1.2，酪蛋白胨1.0~1.2，pH值为7.0~7.2。

5.根据权利要求2所述的大环内酯类化合物的制备方法，其特征在于所述的发酵是用蒸馏水配制发酵培养基，灭菌，将种子培养所得种子液接入到发酵培养基中，置旋转式摇床，在28 ℃条件下发酵培养7~8 天；

其中，所述发酵培养基组成（g/L）：葡萄糖10~12，乳糖25~30，棉籽饼粉25~30，CaCO₃ 0.3~0.4，pH值为7.0~7.2，用蒸馏水配制，于121 ℃下灭菌20 min，按8%（V/V）接种量，将种子液接入到1 L发酵摇瓶中，发酵摇瓶的装液量为100 ml/L，置于250 rpm旋转式摇床，28℃发酵培养7-8 天。

6.根据权利要求2所述的大环内酯类化合物的制备方法，其特征在于所述的分离纯化的方法为：发酵液经100~200目筛网过滤后，滤渣用3~4倍体积甲醇提取，提取液浓缩后用等体积乙酸乙酯萃取3~4次，将萃取液浓缩后依次进行硅胶柱层析和RP-18柱层析后，得到所述的大环内酯类化合物。

7.根据权利要求6所述的大环内酯类化合物的制备方法，其特征在于所述的硅胶柱层析用到的填料是100~200目的硅胶，流动相为石油醚:乙酸乙酯=100:0-50:50 (V/V)进行梯度洗脱，流速10-20 ml/min，依次收集洗脱液，薄层层析（TLC）检测合并相同组分；所述的RP-18柱层析使用混合溶剂，即甲醇:水=80:20-95:5 (V/V)进行梯度洗脱，流速3-5 ml/min，薄层层析（TLC）检测合并相同组分。