[发明专利]用于精准鉴定两代大豆产品转epsps基因的引物组和探针及其鉴定方法有效
| 申请号： | 201610807585.7 | 申请日： | 2016-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN106399493B | 公开（公告）日： | 2018-02-23 |
| 发明（设计）人： | 宋秋池 | 申请（专利权）人： | 四川省农业科学院分析测试中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 成都众恒智合专利代理事务所(普通合伙)51239 | 代理人： | 刘华平 |
| 地址： | 610000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 精准 鉴定 大豆 产品 epsps 基因 引物 探针 及其 方法 | ||
1.用于精准鉴定两代大豆产品转epsps基因的引物组和探针，其特征在于，所述探针的序列为：5’-FAM-TCATCGAGCCGATCATGACGCG-TAMARA-3’；
所述引物组包括上游引物和下游引物，所述上游引物和下游引物的序列分别如下：
上游引物：5'-ACACGCCCGGCATCAC-3'；
下游引物：5'-CTGCAGCATCTTTTCCGTATGA-3'。
2.一种利用权利要求1所述的引物组和探针精准检测两代大豆产品中是否含转epsps基因的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)准备鉴定试剂：25.0μL PCR反应体系、含量为25ng/μL的被测大豆DNA稀释液2μl，所述25.0μL PCR反应体系包括：2×Taqman Master mix 12.5μL、含量均为10.0μmol/L的上流引物和下流引物各1.0μl、含量为10.0μmol/L的探针0.5μL、10μL无菌蒸馏水；
(2)将2μl含量为25ng/μL的被测大豆DNA稀释液加入到25.0μL PCR反应体系的荧光定量PCR仪器上进行扩增反应，即测得被测大豆中是否含转epsps基因；
其中，所述扩增反应包括以下步骤：
(a)在95℃条件下进行DNA预变性反应，时长为10min；
(b)在95℃条件下进行DNA变性反应，时长为15s；
(c)在60℃条件下退火60s；
(d)循环步骤(b)～(c)45次。
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