[发明专利]一种体外诱导胰岛内分泌细胞形成岛样结构的方法在审
申请号: | 201610809003.9 | 申请日: | 2016-09-08 |
公开(公告)号: | CN107805624A | 公开(公告)日: | 2018-03-16 |
发明(设计)人: | 娄晋宁;张文健 | 申请(专利权)人: | 中日友好医院 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N5/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100029*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 体外 诱导 胰岛 内分泌 细胞 形成 结构 方法 | ||
1.一种体外诱导胰岛样结构形成的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
将由成体干细胞或诱导性多能干细胞通过定向诱导分化所制备的胰岛内分泌细胞,或者胰岛来源的胰岛内分泌细胞系进行悬浮培养诱导胰岛样结构形成,所述悬浮培养条件为37℃,5%CO2,95%N2培养4~24h。
2.根据权利要求1所述的体外诱导胰岛样结构形成的方法,其特征在于,所述悬浮培养使用的培养基为添加了下述物质的细胞培养基:20%的胎牛血清、4.5g/L的葡萄糖、1~2mmol/L的Ca2+、0.01~2mmol/L三磷酸腺苷。
3.根据权利要求2所述的体外诱导胰岛样结构形成的方法,其特征在于,培养条件为37℃,5%CO2,50%N2培养6~12小时。
4.根据权利要求2所述的体外诱导胰岛样结构形成的方法,其特征在于,悬浮培养使用的培养容器为不利于细胞黏附和/或贴壁的容器,该容器包括表面非处理型的培养容器或者处理后使细胞不能黏附于表面的培养容器。
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