[发明专利]一种微载体及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明属于生物材料技术领域，特别涉及一种可控表面孔洞打开或关闭，且内部具有孔洞结构的微载体及其制备方法和用途。

背景技术

细胞疗法(Cell therapy)，是继小分子药物、医疗器械、蛋白药物(抗体疫苗)之后的第四大类治疗方法。它以活的人体细胞为治疗材料，通过体外培养扩增，获得足够多细胞数量后，注射回人体，治疗普通药物无法治愈的多种疾病，如组织缺陷受损、各种癌症等。所有的细胞疗法都需要一个体外培养扩增细胞的过程，且对于干细胞和其他多数成熟细胞等都需要贴在物体表面才能生长。传统的培养方法是将细胞培养在培养皿中，单位体积培养效率低下。

微载体培养是目前公认最有发展前途的一种动物细胞大规模培养技术，其兼具悬浮培养和贴壁培养的优点。目前已公布的关于微载体制备的专利申请有CN200510061868.3，CN201310264873.9，CN201510347440.9，CN00128164.X，然而这些微载体由于表面光滑或者孔洞较小，在搅拌过程中细胞不仅不易贴附其表面，而且还会受到剪切力的伤害；传统方法制备的微载体内部实心，密度较大，不易在培养基中保持悬浮状态。此外多孔结构的微载体比表面光滑的微载体有更大的比表面积，可应用于药物缓释或催化剂负载材料

发明内容

本发明的第一目的是提供一种微载体，其表面孔洞打开或关闭，且内部具有孔洞结构，以解决现有技术中上述缺陷。

本发明的第二目的是提供一种微载体的制备方法，制得一种表面孔洞打开或关闭，且内部具有孔洞结构的微载体，以解决现有技术中上述缺陷。

本发明的第三目的是提供一种上述的微载体的用途，用于细胞培养、药物缓释或组织修复填充等用途，以解决现有技术中上述缺陷。

本发明的技术方案如下：

一种微载体，所述的微载体的粒径大小为50～1000μm，所述的微载体表面的孔洞大小为0～500μm，且内部具有孔洞结构，所述的微载体包括以下步骤制得：

(1)混合相溶液的制备

将聚合物与发泡剂溶于不同极性的溶液中，充分混匀两相溶液得到混合相溶液；

(2)微载体的制备

将所述的混合相溶液加到表面活性剂的水溶液中，经混匀、后处理得到表面孔洞关闭或表面孔洞打开的所述的微载体，所述的表面孔洞关闭的微载体与碱或酸溶液混合搅拌，并经后处理得到表面孔洞打开的所述的微载体。

本发明还公开了一种上述的微载体的制备方法，包括以下步骤：

(1)混合相溶液的制备

将所述的聚合物溶于所述的非极性溶剂中形成所述的第一溶液，将所述的发泡剂溶于所述的极性溶剂中形成所述的第二溶液，所述的第二溶液加入到所述的第一溶液，充分混匀得到所述的混合相溶液；

(2)微载体的制备

将所述的混合相溶液加到表面活性剂的水溶液中，经混匀、后处理得到表面孔洞关闭或表面孔洞打开的所述的微载体，所述的表面孔洞关闭的微载体与碱或酸溶液混合搅拌，并经后处理得到表面孔洞打开的所述的微载体。

进一步的优选，所述的聚合物为聚碳酸酯、聚苯乙烯或聚乳酸(LA)-乙醇酸(GA)共聚物其中的一种，具体由乳酸、乙醇酸、己内酯、苯乙烯，丙烯酸-C₄-C₈烷基酯，甲基丙烯酸C₄-C₈烷基酯或烷基芳基酯作为单体单元的共聚物组成的聚合物，更优优选为聚乳酸(LA)-乙醇酸(GA)共聚物，其中LA:GA的比为100:0～50:50，所述的聚合物的分子量为5000～50000。

进一步的优选，所述的非极性溶剂为一种可溶解高分子聚合物且沸点较低的有机溶剂，包括但不局限于乙醇、甲醚、二氯甲烷、三氯甲烷或乙醚其中的一种或几种；所述的极性溶剂为水。

进一步的优选，所述的发泡剂为铵盐(NH₄HCO₃,NH₄HPO₄等)、碳酸盐(NaHCO₃,KHCO₃等)或H₂O₂等能形成气体的无机物，更为优选为碳酸氢铵、碳酸铵、碳酸氢钠、亚硝酸铵其中的一种或几种。

进一步的优选，所述的表面活性剂为阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂，包括但不局限于聚乙烯醇PVA，十二烷基硫酸钠，Tween 80，十二烷基苯磺酸钠其中的一种或几种。