[发明专利]一种由海洋青霉属真菌大规模制备青霉酸的方法

权利要求书

1.一株海洋真菌青霉Penicillium sp.HK1-6，其保藏编号：CGMCC No.12762。

2.权利要求1所述海洋真菌青霉Penicillium sp.HK1-6在制备青霉酸中的应用。

3.一种用权利要求1所述海洋真菌青霉Penicillium sp.HK1-6制备青霉酸的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)先在菌种培养基中对权利要求1所述的海洋真菌青霉Penicillium sp.HK1-6进行菌种培养；所述菌种培养基中含有葡萄糖0.2％–5.0％、酵母膏0.02％–2％、蛋白胨0.02％–2％、琼脂0.2％–3.0％、粗海盐0.05％–5％，适量的水；上述百分比均为重量百分比；培养温度为15–25℃；培养时间为3–7天；

(2)再在发酵培养基中对步骤(1)中的海洋真菌青霉Penicillium sp.HK1-6进行发酵培养；所述发酵培养基中含有葡萄糖0.2％–5.0％、酵母膏0.02％–2％、蛋白胨0.02％–2％、粗海盐0.05％–5％，适量的水；上述百分比均为重量百分比；培养温度为15–25℃；培养时间为4–5周；

(3)将步骤(2)得到的发酵物中的发酵液和菌体分离，发酵液用有机溶剂A萃取2～4次，合并萃取液后减压浓缩得到发酵液浸膏；菌体用有机溶剂B浸提2～4次，合并浸提液后减压浓缩得到菌体浸膏；合并发酵液浸膏和菌体浸膏，进行色谱分离得粗品；所述的有机溶剂A选自乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿或乙醚中的一种或几种；所述的有机溶剂B选自甲醇、乙醇、THF或丙酮中的一种或几种；

(4)步骤(3)得到的粗品经重结晶或色谱分离，得到青霉酸纯品。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述的重结晶采用水、甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷、丙酮、氯仿、戊烷、己烷、乙酸乙酯或石油醚中的一种或几种作为重结晶溶剂。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述的色谱分离是正相硅胶柱色谱分离、反相硅胶柱色谱或凝胶柱色谱分离中的一种或几种组合。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述正相硅胶柱色谱分离中采用的固定相的硅胶目数为100～200目、200～300目或300～400目；流动相为乙酸乙酯/石油醚体积比为1/10～3/5的混合溶剂或者甲醇/二氯甲烷体积比为1/30～1/8的混合溶剂。