[发明专利]基于组织培养的多刺老鼠簕快速繁育方法

权利要求书

1.一种基于组织培养的多刺老鼠簕快速繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)培养基的配制，包括组培各阶段培养基的组分和含量：

1.1、芽诱导培养基：MS+BA 1-3mg/L+NAA 0.1-0.3mg/L；

1.2、不定芽增殖培养基：MS+6-BA 0.5-1.5mg/L+NAA 0.05-0.15mg/L；

1.3、壮苗培养基：MS+6-BA 0.1-1mg/L+NAA 0.05-0.15mg/L；

1.4、生根培养基：MS+NAA 0.1-0.3mg/L；

上述各种培养基的pH5.8，加入蔗糖30g/L，琼脂6g/L，培养温度为25±1℃，光照为1700-1900Lx；

(2)多刺老鼠簕的组织培养：

2.1、无菌材料的获得

多刺老鼠簕在春季3-4月挖取地上部分的小芽，用自来水冲洗1h后于超净工作台上，用75％的乙醇浸泡30s，1‰升汞浸泡15min，无菌水冲洗5-6次，无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成1cm长，接种于芽诱导培养基上；

2.2、芽的分化和增殖

小芽接种于诱导培养基上30天后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突起,再培养25天可见明显的愈伤组织，继续培养30天，切下带芽愈伤组织放入不定芽增殖培养基上培养；

2.3、不定芽壮苗培养

在不定芽增殖培养基上，诱导出的丛生芽每丛只有2-3小芽可以伸长，其余处于矮化状态，分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm；

2.4、生根培养

取1-2cm的小植株，转接入生根培养基中诱导生根，20天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至1-2cm；

2.5、炼苗与移栽

生根培养28-32天后，根系长至1-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化炼苗40天后，即移栽室外，给予肥水管理，移栽成活率为90％以上。

2.根据权利要求1所述的一种基于组织培养的多刺老鼠簕快速繁育方法，其特征在于，所述的芽诱导培养基的组分和含量为：MS+BA 2mg/L+NAA 0.2mg/L。

3.根据权利要求1所述的一种基于组织培养的多刺老鼠簕快速繁育方法，其特征在于，所述的不定芽增殖培养基的组分和含量为：MS+6-BA 1mg/L+NAA0.1mg/L。

4.根据权利要求1所述的一种基于组织培养的多刺老鼠簕快速繁育方法，其特征在于，所述的壮苗培养基的组分和含量为：MS+6-BA 0.5mg/L+NAA0.1mg/L。

5.根据权利要求1所述的一种基于组织培养的多刺老鼠簕快速繁育方法，其特征在于，所述的生根培养基的组分和含量为：MS+NAA 0.2mg/L。