[发明专利]同时定量检测海带生物转化液中小分子降血压肽的方法

权利要求书

1.同时定量检测海带生物转化液中小分子降血压肽的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）取对照品，制成对照品溶液，用液相色谱进行检测，得到标准曲线；

（2）海带生物转化液制备：采用商业化蛋白酶混合酶解海带粗蛋白，得到富含小分子肽的海带生物转化液；

（3）采用液相色谱对上述海带生物转化液进行检测，检测条件为：

色谱柱为C18反相柱，流动相A为0.1%vol三氟乙酸-乙腈溶液，流动相B为0.1%vol三氟乙酸-水溶液；

（4）比较样品和对照品的峰图，确定待检海带生物转化液中是否含有小分子降血压肽并定量；

（5）对小分子降血压肽进行结构鉴定和血管紧张素转化酶ACE抑制活性检测。

2.权利要求1所述的同时定量检测海带生物转化液中小分子降血压肽的方法，其特征是：所述步骤（1）中所使用的混合酶为胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶中的一种或者几种的混合物。

3.权利要求1所述的同时定量检测海带生物转化液中小分子降血压肽的方法，其特征是：所述检测条件中采用梯度洗脱，其洗脱条件按时间分段设定为：0至10 min，流动相A的浓度逐渐由3～6%上升为13～16%，10至17 min逐步上升为20～25%，17至22 min继续上升至33～36%，22至23 min下降至3～6%；流速为0.5～0.8 mL/min。

4.权利要求1所述的同时定量检测海带生物转化液中小分子降血压肽的方法，其特征是：所述检测条件中柱温为35～50℃，进样量为5～15μL，检测波长为216～220 nm。

5.权利要求1所述的同时定量检测海带生物转化液中小分子降血压肽的方法，其特征是：所述的小分子降血压肽为赖氨酸-酪氨酸、甘氨酸-赖氨酸-酪氨酸、丝氨酸-赖氨酸-苏氨酸-酪氨酸、丙氨酸-赖氨酸-酪氨酸、丙氨酸-赖氨酸-酪氨酸-丝氨酸-酪氨酸、赖氨酸-赖氨酸-苯丙氨酸-酪氨酸、苯丙氨酸-酪氨酸、赖氨酸-苯丙氨酸-赖氨酸-酪氨酸。

6.权利要求1所述的同时定量检测海带生物转化液中小分子降血压肽的方法在检测其他藻类生物转化液中小分子降血压肽中的应用。