[发明专利]一种测定脂肪乳制剂药物包封率的方法及其应用

说明书

本发明提供一种测定脂肪乳药物包封率的方法，所述方法包括以下步骤：(1)将弱碱性阴离子交换树脂填充于柱管内，脱水；(2)将含阴离子的药物的脂肪乳制剂加到柱管内，然后进行洗脱；(3)收集洗脱得到的脂肪乳，根据洗脱得到的脂肪乳滴中被包封的药物的含量以及洗脱前脂肪乳制剂的药物的用量计算脂肪乳制剂的药物包封率。本发明的方法解决了现有技术中存在的脂质乳滴与游离药物分离度差、测定结果偏大的问题。该方法准确度高，重复性好，可用于前列地尔等结构中含阴离子(即COO^‑)的药物脂肪乳制剂的处方工艺研究和质量控制。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体地涉及一种用于测定脂肪乳制剂药物包封率的方法以及该方法在分离被包封的脂肪乳药物与未被包封的脂肪乳药物中的应用。

背景技术

目前测定脂肪乳制剂包封率的方法主要有以下几种：

第一种方法是采用超滤离心法测定脂肪乳制剂的包封率，利用超滤膜截留乳滴，从而离心出水相。实验时尝试采用赛多利斯和波尔的超滤管(3K、5K、10K)测定前列地尔脂肪乳注射液(其化学结构如下所示)的包封率。但是实际中发现，不同的滤膜对前列地尔均有不同程度的吸附作用，也就是说，采用该方法测定前列地尔脂肪乳注射液的包封率会导致测定结果偏大。

前列地尔的化学结构式如下所示：

第二种方法是采用透析法测定脂肪乳制剂的包封率。该方法可以处理较大量的样品，但需要较大量的透析液和较长的时间，并且需要不断地更换透析液。此外，该方法不适用于难溶于水的药物。发明人曾采用该方法测定前列地尔脂肪乳注射液的包封率，但由于该药规格(5μg/ml)较小，且微溶于水，需要使用大量的水将游离药物透析出来，之后再测定游离药物的浓度。由于对游离药物的稀释量很大，因此在采用这种间接的方法测定包封率时存在一定的限制，其透析液中的前列地尔的浓度达不到液相测定的检测限。

第三种方法是采用葡聚糖微型凝胶柱测定载药脂质体的包封率。通过先去除葡聚糖微型凝胶柱中的水，再将载药脂肪乳加载到葡聚糖微型凝胶柱上，离心洗脱脂质体；然后分别测定载药脂肪乳中药物的总含量浓度及葡聚糖微型凝胶柱洗脱后被包封的药物的含量浓度，将葡聚糖微柱洗脱后被包封的药物的含量浓度除以脂肪乳中药物的总含量浓度得到载药脂质体的包封率。发明人也曾尝试采用这种方法测定前列地尔脂肪乳注射液的包封率，但是做该方法的方法学验证时，发现当采用游离的前列地尔上样时，游离的前列地尔也被洗脱下来，也就是说，脂质乳滴与游离药物分离度较差，这样会造成包封率的测定结果不准确。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明提供一种测定脂肪乳制剂药物包封率的方法，该方法包括以下步骤：

(1)将弱碱性阴离子交换树脂填充于柱管内，脱水；

(2)将含阴离子的药物的脂肪乳制剂加到柱管内，然后进行洗脱；

(3)收集洗脱得到的脂肪乳滴，根据洗脱得到的脂肪乳滴中被包封的药物含量以及洗脱前脂肪乳制剂的药物用量计算脂肪乳制剂中的药物包封率。

计算公式：

优选地，在上述步骤(1)中，所述弱碱性阴离子交换树脂为DEAE琼脂糖凝胶FF。

优选地，在上述步骤(1)中，所述脱水为离心脱水或真空抽吸脱水。

优选地，在上述步骤(2)中，所述含阴离子的药物为含羧基的药物；更优选地，所述含阴离子的药物的脂肪乳制剂为前列地尔注射液。

优选地，在上述步骤(2)中，加载到柱管内的含阴离子的药物的脂肪乳制剂的体积为柱体积的1％-100％，优选为15％-25％。加载到柱管内的含阴离子的药物的脂肪乳制剂的体积过大会导致弱碱性阴离子交换树脂过载，未被包封的药物也被洗脱下来，影响分离和测定效果。