[发明专利]一种从细胞悬液中提取和纯化包裹药物的细胞囊泡的方法有效
申请号: | 201610866539.4 | 申请日: | 2016-09-30 |
公开(公告)号: | CN107875124B | 公开(公告)日: | 2021-08-06 |
发明(设计)人: | 张一;李凯 | 申请(专利权)人: | 湖北盛齐安生物科技股份有限公司 |
主分类号: | A61K9/127 | 分类号: | A61K9/127;A61K47/46;A61K31/519;A61K31/704;A61P35/00 |
代理公司: | 北京律诚同业知识产权代理有限公司 11006 | 代理人: | 黄韧敏 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞 悬液中 提取 纯化 包裹 药物 方法 | ||
1.一种从细胞悬液中提取和纯化包裹药物的细胞囊泡的方法,包括:
1)将细胞悬液过滤,收集滤液;
2)将步骤1)收集的滤液离心,收集沉淀,获得包裹药物的细胞囊泡;
其中步骤1)所述的过滤为将所述细胞悬液通过孔径为5μm-10μm的滤膜或滤芯过滤;
步骤2)所述的离心为以100-100000g的离心力高速离心;
其中,所述的细胞悬液的制备方法为:
用化学、物理或生物方法使细胞发生凋亡,将凋亡的细胞与肿瘤治疗药接触,使得所述肿瘤治疗药被包裹进入凋亡的细胞,所述的包裹药物的细胞囊泡为凋亡细胞释放的含有肿瘤治疗药的微颗粒,所述的细胞悬液为包含所述细胞、细胞碎片和细胞囊泡的混合液。
2.根据权利要求1所述的提取和纯化包裹药物的细胞囊泡的方法,其中所述的滤膜或者滤芯的材质为选自聚丙烯、聚偏氟乙烯、聚四氟乙烯和尼龙中的一种。
3.根据权利要求2所述的提取和纯化包裹药物的细胞囊泡的方法,其中所述的滤膜选自PALL公司的聚丙烯J100047050、Millipore公司的聚偏氟乙烯SVWG04700、Millipore公司的聚四氟乙烯LSWG04700、PALL公司的聚四氟乙烯JCWP04700和PALL公司的尼龙NCG047100中的一种。
4.根据权利要求2所述的提取和纯化包裹药物的细胞囊泡的方法,其中所述的滤芯为PALL公司的聚丙烯KA3J100P1。
5.根据权利要求1所述的提取和纯化包裹药物的细胞囊泡的方法,其中所述的高速离心为以100-100000g的离心力离心30-90分钟。
6.根据权利要求1所述的提取和纯化包裹药物的细胞囊泡的方法,其中所述细胞为真核细胞。
7.根据权利要求1所述的提取和纯化包裹药物的细胞囊泡的方法,其中所述细胞为肿瘤细胞或红细胞。
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