[发明专利]一种富含γ‑亚麻酸的螺旋藻糖脂制备方法

权利要求书

1.一种富含γ-亚麻酸的螺旋藻糖脂制备方法，该方法包括以下步骤：

S1：乙醇浸提，将螺旋藻粉与乙醇按质量体积比1:6～10的比例混合均匀，恒温搅拌提取，提取温度为室温～60℃，提取时间为30～120min；

S2：螺旋藻粗脂获取，经乙醇提取后的粗提物，高速离心分离藻渣及上清液，上清液利用真空浓缩脱除有机溶剂，真空冷冻干燥后即得螺旋藻粗脂提取物；

S3：柱层析分离纯化，柱层析分离纯化步骤S2得到的螺旋藻粗脂提取物，上样量与柱层析硅胶量按质量比1:30～200上样，柱层析流动相为乙醇和正己烷混合溶剂。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，S1中提取温度为35-50℃，螺旋藻粉与乙醇的比例为1：6～8。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的螺旋藻为钝顶螺旋藻、极大螺旋藻以及盐泽螺旋藻中任意一种。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的分离纯化填料为200-400目柱层析硅胶。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的提取、分离纯化溶剂乙醇和正己烷为食品级乙醇和正己烷。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述乙醇和正己烷混合溶剂中乙醇与正己烷比例为1:1～10(v/v)。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述上样量与柱层析硅胶量按1:50～200(g/g)。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述上样量与柱层析硅胶量按1:200(g/g)。

9.如权利要求1～7任意一项所述的方法，其特征在于，S2和S3之间还包括大孔吸附树脂脱除步骤。

10.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂脱除螺旋藻粗脂提取物中得色素，上样浓度1.25～2.50mg/mL，上样2～3个柱体积，洗脱剂选择70～100％乙醇，洗脱2～6个柱体积，得脱除色素螺旋藻粗提物。

11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述色素包括叶黄素和叶绿素；所述大孔吸附树脂为D101、HP20和HP2MGL中的一种。

12.如权利要求1～7任意一项所述的方法，其特征在于，还包括气相色谱测定总脂肪酸及γ-亚麻酸含量的步骤，具体为：

S4：将S3收集的洗脱液进行薄层色谱法分析，碘蒸气染色，确定糖脂MGDG在洗脱液中的位置；

S5:将S4收集的洗脱液真空浓缩脱除有机溶剂，真空冷冻干燥后，即得富含γ-亚麻酸的螺旋藻糖脂，随后进行直接转甲酯化反应，进而通过GC-MS测定洗脱液中总脂肪酸及γ-亚麻酸的含量。