[发明专利]一种活化部分凝血活酶时间检测试剂及其检测方法

权利要求书

1.一种活化部分凝血活酶时间检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括新鲜兔脑浸液。

2.根据权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，所述新鲜兔脑浸液按重量百分比计占所述检测试剂的5-30％，优选为10-15％，进一步优选为12％。

3.根据权利要求1或2所述的检测试剂，其特征在于，所述新鲜兔脑浸液的制备方法包括如下步骤：将新鲜兔头剥开脑壳，去除表层物质，称重研磨，加入生理盐水后水浴静置，离心取上清得到新鲜兔脑浸液；

优选地，所述研磨后的兔脑与生理盐水的体积比为1:(2-8)，优选为1:(4-6)，进一步优选为1:4；

优选地，所述水浴的温度为40-65℃，优选为50-60℃，进一步优选为54℃；

优选地，所述水浴的时间为45-80min，优选为55-70min，进一步优选为60min；

优选地，所述离心的转速为2000-4000rpm，优选为2500-3200rpm，进一步优选为3000rpm；

优选地，所述离心的时间为8-20min，优选为10-18min，进一步优选为15min。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括R1和R2组成的缓冲体系；

其中，所述R1按体积百分比包括如下原料：Tris 2-12％、4-氨基安替比林0.01-0.8％、氯化钠0.1-1.5％、聚乙二醇0.01-0.8％、牛血清蛋白0.1-1％、聚乙二醇辛基苯基醚0.01-0.8％、甘露醇1-12％、甘氨酸1-12％、硫柳汞0.01-0.1％、鞣花酸0.01-0.1％和新鲜兔脑浸液5-30％，余量为水；

所述R2包括浓度为15-40mM的氯化钙。

5.根据权利要求4所述的检测试剂，其特征在于，所述R1按体积百分比包括如下原料：Tris 4-8％、4-氨基安替比林0.05-0.1％、氯化钠0.4-0.8％、聚乙二醇0.05-0.2％、牛血清蛋白0.2-0.5％、聚乙二醇辛基苯基醚0.05-0.1％、甘露醇3-6％、甘氨酸3-6％、硫柳汞0.02-0.06％、鞣花酸0.02-0.06％和新鲜兔脑浸液10-15％，余量为水；

优选地，所述R1按体积百分比包括如下原料；Tris 6％、4-氨基安替比林0.06％、氯化钠0.48％、聚乙二醇0.12％、牛血清蛋白0.4％、聚乙二醇辛基苯基醚0.08％、甘露醇4％、甘氨酸4％、硫柳汞0.05％、鞣花酸0.03％和新鲜兔脑浸液12％，余量为水；

优选地，所述R2包括浓度为20-30mM的氯化钙，优选为25mM的氯化钙。

6.根据权利要求4或5所述的检测试剂，其特征在于，所述聚乙二醇的平均分子量为1000-3000，优选为1200-1800，进一步优选为1500；

优选地，所述R1的pH为7-8.5，优选为7.2-7.8。

7.一种如权利要求1-6中任一项所述的检测试剂在非诊断和治疗的检测内源性凝血因子缺乏的使用方法，其特征在于，包括如下步骤：向待检测样品中加入R1孵育后再加入R2反应，即可得到所要检测的凝血活酶时间。

8.根据权利要求7所述的使用方法，其特征在于，所述待测样品：R1：R2的体积比为1:1:1。

9.根据权利要求7或8所述的使用方法，其特征在于，所述待检测样品与R1孵育的温度为35-40℃，优选为37℃；

优选地，所述待检测样品与R1孵育的时间为40-100s，优选为60s。

10.一种活化部分凝血活酶时间检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1-6中任一项所述的检测试剂。