[发明专利]一种白穗柯初代培养芽诱导方法

权利要求书

1.一种白穗柯初代培养芽诱导方法，其特征在于：采用白穗柯基部萌条为外植体，通过外植体无菌处理后，将外植体接种于优质初代培养芽诱导培养基上，置于适宜的温度、湿度和光照强度条件下进行培养，诱导芽的萌发；其操作步骤为，

（1）外植体选择：选择白穗柯基部萌发的半木质化的萌条为外植体；

（2）外植体消毒及接种：将白穗柯萌条经过洗洁精清洗，流水冲洗和化学试剂处理消毒后，剪切成茎段接入芽诱导培养基中；

（3）芽诱导培养：将接种后的外植体置于适宜室内条件下培养。

2.根据权利要求1所述的一种白穗柯初代培养芽诱导方法，其特征在于：所述的芽诱导培养基其原料含量为：1/3～1/2改良WPM培养基+6-BA 1.0～2.0mg/L+维生素C10mg/L+乳糖5.0g/L+蔗糖20.0g/L。

3.根据权利要求2所述的一种白穗柯初代培养芽诱导方法，其特征在于：所述的改良WPM培养基组分和体积重量比为：NH₄NO₃ 810 mg/L，CaCl₂·2H₂O 192 mg/L，MgSO₄·7H₂0 300 mg/L，KH₂PO₄ 250 mg/L，Ca(NO₃)₂·4H₂O 180 mg/L，KI 0.83 mg/L，H₃BO₃ 6.2 mg/L，MnSO₄·H₂O 22.4 mg/L，ZnSO₄·7H₂O 8.6 mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.25 mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.25 mg/L，Na₂·EDTA 37.3 mg/L，FeSO₄·7H₂O 27.8 mg/L，肌醇100 mg/L，烟酸1.0 mg/L，盐酸吡哆醇1.0 mg/L，盐酸硫胺素2.0 mg/L，甘氨酸2.0 mg/L。

4.根据权利要求1所述的一种白穗柯初代培养芽诱导方法，其特征在于：所述的萌条是长为6~9cm、直径0.2～0.4 cm的半木质化的萌条。

5.根据权利要求1所述的一种白穗柯初代培养芽诱导方法，其特征在于：步骤（2）所述的消毒及接种方法是将白穗柯萌条针叶剪去，置于三角瓶中，加入体积浓度为1~5 %的洗洁精溶液，采用纱布封住瓶口，置于转速为200 r/min的摇床上清洗10~15 min后置于流水下冲洗1~2 h，然后用无菌水清洗2次，将外植体转到超净工作台上用体积浓度0.1%氯化汞溶液浸泡消毒10 min；再采用无菌水冲洗8~10次后剪成长为3.5~4.0 cm长的茎段接种于芽诱导培养基中，每瓶接种2个茎段。

6.根据权利要求1所述的一种白穗柯初代培养芽诱导方法，其特征在于：步骤（3）所述的适宜室内条件为：暗培养10d后转为光照500～1000 lx，光照8～12h/d；培养温度20±1℃，湿度为50~55 %。