[发明专利]一种制备骨诱导成骨制剂的方法在审
申请号: | 201610904981.1 | 申请日: | 2016-10-17 |
公开(公告)号: | CN107496986A | 公开(公告)日: | 2017-12-22 |
发明(设计)人: | 边俊杰 | 申请(专利权)人: | 浙江善时生物药械(商丘)有限公司 |
主分类号: | A61L27/36 | 分类号: | A61L27/36;A61L27/22;A61L27/54;A61K35/32;A61K38/18;A61P19/08 |
代理公司: | 杭州天昊专利代理事务所(特殊普通合伙)33283 | 代理人: | 向庆宁 |
地址: | 476000 河南省*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 制备 诱导 制剂 方法 | ||
1.一种制备骨诱导成骨制剂的方法,该方法包括如下步骤:1.对2份牙基质进行脱钙处理;2.然后再对经过脱钙处理的2份牙基质进行提取骨形态发生蛋白;3.最后让提取的骨形态发生蛋白与其中的1份脱钙处理的牙基质进行混合,从而形成诱导成骨制剂。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,提取骨形态发生蛋白的方法如下:让脱钙的牙基质粉末悬浮在PH=7.2的磷酸盐缓冲液中;在水浴锅内加热处理磷酸盐缓冲液280小时,温度为35-40摄氏度,在加热处理的过程中,不断的搅拌;然后进行离心,分离上清液和沉淀物质,对上清液进行常规分子筛分离目的蛋白的纯化和浓缩,最终获得BMP蛋白活性提取物。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中,提取的活性BMP蛋白的分子量为20--50kda。
4.根据权利要求3所述的方法,其中,把提取获得的BMP小分子蛋白与1份通过脱钙和提取蛋白后的牙基质颗粒剂或者冻干粉进行混合处理,让BMP小分子和颗粒剂或者冻干粉进行结合。
5.根据权利要求4所述的方法,其中,所述的结合处理的方法如下:首先让脱钙,经过蛋白提取的2份牙基质粉末中的1份悬浮在PH=7.0的磷酸盐缓冲液中,然后把从2份牙基质中提取的BMP蛋白用磷酸盐缓冲液溶解,然后两者混合在一起,放到搅拌机器上进行匀速缓慢搅拌,搅拌的速率为20-120转/分钟,同时在室温下或者25-30摄氏度下进行搅拌12-56小时,在搅拌的时候,每隔3小时测量一次混合溶液的BMP蛋白的浓度,直到浓度下降到初始BMP浓度的10%-15%以下停止搅拌,然后通过离心,去掉上清液体,剩下的粉末进行过滤,然后经过低温干燥。
6.根据权利要求1-5之一所述的方法,其中,在诱导成骨制剂中包括有维生素B2。
7.一种通过权利要求1-6之一制备的骨诱导成骨颗粒剂或者冻干粉制剂,其中所述的制剂的颗粒剂或者冻干粉呈圆棒状,长度约为80—180nm,直径约为30一7Onm。
8.根据权利要求7所述的成骨颗粒剂或者冻干粉制剂,所述的成骨颗粒剂或者冻干粉制剂中包括维生素B2。
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