[发明专利]独蒜兰组织培养一步成苗培养方法

权利要求书

1.一种独蒜兰组织培养一步成苗培养方法，其特征在于：包括如下步骤：

1）优良种子的获得：选择芽眼饱满、个头大、无病害的独蒜兰假鳞茎，于当年11月-翌年2月栽种，3月～4月开花后进行独蒜兰人工授粉；

2）蒴果的采收与选择：授粉后190-210天，挑选饱满的黄色蒴果，适时采收；

3）无菌播种：蒴果采收后，先用水冲洗干净硕果表面，然后用酒精擦拭蒴果表面消毒处理，在无菌条件下，将种子均匀地播种到播种培养基表面，播种瓶放在培养室中培养3周后种子开始萌发成绿色原球茎，2个月后长成带叶的幼苗；

步骤3）中所述的播种培养基是以B5培养基为基础，包含0.5mg/L NAA、20 g/L 蔗糖、6.5g/L琼脂及0.5 g/L活性炭，pH值为5.8，培养基分装后在121℃灭菌25分钟备用；播种好的培养瓶在培养室培养的条件是：温度为 22±1℃，光照时间12h/d，光照强度1800-2000lx；

4）幼苗转接：将带叶幼苗转接到MSN培养基上，每瓶转接15株；转接后的幼苗及时放在培养室中培养，生长3-4个月后形成球茎直径0.7-0.9cm的幼苗，即可出瓶移栽；步骤4）中所述的MSN培养基包括硝酸钾 KNO₃：850-1050mg/L，硝酸铵 NH₄NO₃：300-450 mg/L；磷酸二氢钾 KH₂PO₄：112-212 mg/L；硫酸镁 MgSO₄.7H₂O：150-230mg/L；氯化钙 CaCl₂：180-260mg/L；微量元素、有机物和铁盐的组成成分和MS相同，但是浓度减半；NAA的浓度为1.0-1.2mg/L；蔗糖的浓度为20-30g/L；琼脂的浓度为6-7g/L；活性炭的浓度为0.5-1.5g/L；土豆汁的浓度为50-150g/L。

2.根据权利要求1所述的独蒜兰组织培养一步成苗培养方法，其特征在于：步骤3）中所述的用酒精擦拭蒴果表面消毒处理是指，用浸泡过质量百分比为75%酒精的脱脂棉对独蒜兰蒴果表面擦拭2-3次，然后将蒴果放置在消过毒的培养皿中，再在杀过菌的超净工作台上再用酒精浸泡的棉球擦蒴果表皮，用消毒过的镊子夹住蒴果在酒精灯外焰处来回快速烧2-3秒，如此反复烧2次，即完成对独蒜兰蒴果的消毒。

3.根据权利要求1所述的独蒜兰组织培养一步成苗培养方法，其特征在于：所述步骤4）中，幼苗转接后的培养条件为温度为 22±1℃，光照时间14h/d，光照强度2000-2200 lx。