[发明专利]风热感冒颗粒HPLC特征图谱的构建方法

说明书

一种风热感冒颗粒HPLC特征图谱的构建方法，包括下述步骤（1）参照物溶液的制备：精密称取牛蒡苷对照品适量，加30~70%甲醇制成每1ml含牛蒡苷60~80μg的溶液，即得。（2）供试品溶液的制备:取风热感冒颗粒，研细，取约1~3g，精密称定，（3）色谱条件：采用ZORBAX SB‑C18色谱柱；流动相为以乙腈‑0.1％磷酸溶液为5~45：95~55的混合溶液；流速为0.5～1.5ml/min；DAD检测器，检测波长为205～285nm；柱温25～45℃，理论板数均不低于10000。（4）测定：分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各5～20μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到风热感冒颗粒的HPLC特征图谱，本发明的优点是能有效的监控不同批次间风寒感冒颗粒的质量，方法具有精密度高、重现性好等特点，有利于全面监控产品的质量。

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种风热感冒颗粒HPLC特征图谱的构建方法。

背景技术

风热感冒颗粒为临床常用中药复方制剂，由板蓝根、连翘、薄荷、荆芥穗、桑叶、芦根、牛蒡子、菊花、苦杏仁、桑枝、六神曲等组成，功能主治为清温解毒，宜肺利咽。用于感冒身热，鼻塞，头痛，咳嗽，多痰。现执行标准收载于中成药部颁标准，标准编号为WS₃-B-0044-89，标准中仅收载了性状、溶化性等颗粒剂常规检查项，由于质量控制水平较低，在药材投料过程中可能存在少投或以次充好现象，不能保证产品内在质量的均一和疗效的稳定，存在质量安全隐患。为了提高风热感冒颗粒药品的质量，已经对全方进行了质量检测方法研究，但因中药复方制剂中药味较多成分复杂不易分离鉴定等特点，现有技术检测均集中为薄层鉴别及含量测定单一指标的研究，仅对风热感冒颗粒处方中连翘、牛蒡子等个别药味进行了定性鉴别和定量检测，由于本品处方药味较多，难以反映样品的整体质量。

本发明中我们对风热感冒颗粒进行了HPLC特征图谱试验研究，建立了特征图谱的质量检测方法，并对所建立方法进行了精密度、重复性等方法学验证试验，结果表明本发明中检测方法稳定可行。本发明克服了风热感冒颗粒现在执行标准中缺少质量检测方法的不足，以及现有技术中检测方法指标针对性强、覆盖面小的片面性，建立起的特征图谱可全面反映风热感冒颗粒复杂的化学成分及其相对比例，是一种符合中药复方特色的质量控制模式，可有效地表征药品质量。

发明内容

本发明的目的之一是提供中成药风热感冒颗粒的HPLC特征图谱的构建方法，该方法包括以下步骤：

(1)参照物溶液的制备：精密称取牛蒡苷对照品适量，加30～70％甲醇制成每1ml含牛蒡苷60～80μg的溶液，即得。

(2)供试品溶液的制备:取风热感冒颗粒，研细，取约1～3g，精密称定，精密加入30～70％甲醇25～75ml，称定重量，超声处理15～45分钟，待溶液冷却至室温，用30～70％甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.22～0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

(3)色谱条件：采用ZORBAX SB-C18色谱柱(柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm)；流动相为以乙腈-0.1％磷酸溶液为5～45：95～55的混合溶液；流速为0.5～1.5ml/min；DAD检测器，检测波长为205～285nm；柱温25～45℃，理论板数均不低于10000。

(4)测定：分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各5～20μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到风热感冒颗粒的HPLC特征图谱。

本发明的HPLC特征图谱的最佳构建方法如下：

优选地，步骤(1)所述参照物溶液浓度为每1ml含牛蒡苷对照品70μg的50％甲醇溶液。

优选地，步骤(2)所述供试品溶液的制备步骤如下：取风热感冒颗粒，研细，取约2g，精密称定，精密加入50％甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，待溶液冷却至室温，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.22～0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。