[发明专利]一种风寒感冒颗粒HPLC特征图谱的构建方法

权利要求书

1.一种风寒感冒颗粒HPLC特征图谱的构建方法，其特征是：包括下述步骤：

(1)参照物溶液的制备：取葛根素对照品适量，精密称定，加30～100％甲醇制成每1ml含40～60μg的溶液；

(2)供试品溶液的制备：取风寒感冒颗粒研细，取2～5g，精密称定，精密加入30～100％甲醇25ml或50～100ml，称定重量，超声处理30～60分钟，放冷，用30～100％甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.22～0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；

(3)色谱条件：采用ZORBAX SB-C18色谱柱，所述色谱柱的柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm；流动相为以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，梯度洗脱，梯度洗脱的时间及流动相比例为：0～20min，A相：3％、B相：97％；20～35min，A相：3～9％、B相：97～91％；35～60min，A相：9～19％、B相：91～81％；60～85min，A相：19～50％、B相：81～50％；85～90min，A相：50～70％、B相：50～30％；90～100min，A相：70～3％、B相：30～97％；100～110min，A相：3％、B相：97％；体积流量0.5～1.5ml/min；DAD检测器，波长为190～250nm；柱温25～45℃，理论板数均不低于10000；

(4)测定：分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各5～20μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到风寒感冒颗粒的HPLC特征图谱。

2.根据权利要求1所述的一种风寒感冒颗粒HPLC特征图谱的构建方法，其特征是：

步骤(1)所述参照物溶液浓度为每1ml 50％甲醇含50μg葛根素对照品。

3.根据权利要求1所述的一种风寒感冒颗粒HPLC特征图谱的构建方法，其特征是：

步骤(2)所述供试品溶液的制备步骤如下：取风寒感冒颗粒研细，取2g，精密称定，精密加入50％甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

4.根据权利要求1所述的一种风寒感冒颗粒HPLC特征图谱的构建方法，其特征是：

步骤(4)按照前述方法构建15批中成药风寒感冒颗粒的HPLC特征图谱，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件生成由8个共有峰构成的对照特征图谱，所述共有峰中峰2为盐酸麻黄碱峰，峰3为盐酸伪麻黄碱峰，峰4为葛根素峰，峰7为升麻素苷峰，峰8为橙皮苷峰。

5.根据权利要求1所述的一种风寒感冒颗粒HPLC特征图谱的构建方法，其特征是：还包括：

步骤(5)取风寒感冒颗粒，按上述方法操作，得到风寒感冒颗粒样品特征图谱，采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件对样品图谱与对照特征图谱进行分析，相似度大于0.90为合格产品。

6.根据权利要求5所述的一种风寒感冒颗粒HPLC特征图谱的构建方法，其特征是：在对照特征图谱中，以葛根素为参照峰S，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，所述相对保留时间在第一规定值的±5％之内，所述第一规定值为：0.37-峰1、0.53-峰2、0.58-峰3、1.00-峰S、1.03-峰5、1.05-峰6、1.11-峰7、1.39-峰8。