[发明专利]一种风寒感冒颗粒HPLC特征图谱的构建方法

说明书

一种风寒感冒颗粒HPLC特征图谱的构建方法，包括下述步骤：（1）参照物溶液的制备：取葛根素对照品适量，精密称定，（2）供试品溶液的制备：取风寒感冒颗粒研细，取约2~5g，精密称定，（3）色谱条件：采用ZORBAX SB‑C18色谱柱，流动相为以乙腈‑0.1％磷酸溶液为3~70：97~30的混合溶液；体积流量0.5～1.5ml/min；DAD检测器，波长为190～250nm；柱温25～45℃，理论板数均不低于10000，（4）测定：分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各5～20μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到风寒感冒颗粒的HPLC特征图谱；本发明的优点是能有效的监控不同批次间风寒感冒颗粒的质量，方法具有精密度高、重现性好等特点，有利于全面监控产品的质量。

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及中成药风寒感冒颗粒HPLC特征图谱的构建方法。

背景技术

风寒感冒颗粒是由麻黄、葛根、紫苏叶、防风、桂枝、白芷、陈皮、苦杏仁、桔梗、甘草、干姜等十一味中草药组成。主要功能为解表发汗，疏风散寒。用于感冒身热，头痛，咳嗽，鼻塞，流涕等症。现执行质量标准收载于中成药部颁标准，标准号为WS3-B-0045-89，标准中未收载薄层色谱鉴别及含量测定等质量控制方法。由于没有对产品的中间体、成口进行质量监控的有效手段，产品质量不能得到科学的监控，不同厂家生产出的样品间及批间质量差异较大，导致临床应用疗效差异也较大。为了提高风寒感冒颗粒药品的质量，已经对全方进行了质量检测方法研究，但因中药复方制剂中药味较多成分复杂不易分离鉴定等特点，仅能建立起几种专属性强的定性定量检测方法对方中个别成分进行监控，虽然现有技术风寒感冒颗粒的检测方法(专利号：CN 103267824B)中对方中麻黄、桔梗进行了定性和定量检测，但只能反映出制剂中麻黄、桔梗所含成分的质量情况，并不能体现药品的整体质量情况。

到本发明中我们对风寒感冒颗粒进行了HPLC特征图谱试验研究，建立了特征图谱的质量检测方法，并对所建立方法进行了精密度、重复性等方法学验证试验，结果表明本发明中检测方法稳定可行。本发明克服了风寒感冒颗粒现在执行标准中缺少质量检测方法的不足，以及现有技术中检测方法只能反映极少药物成分质量情况的片面性，建立的特征图谱测定方法是风寒感冒颗粒质量控制方法的有效补充，能反映出所含化学成分的种类和数量，能有效表征其质量，有利于全面控制产品的质量。

发明内容

本发明的目的是提供中成药风寒感冒颗粒的HPLC特征图谱的构建方法，该方法包括以下步骤：

(1)参照物溶液的制备：取葛根素对照品适量，精密称定，加30～100％甲醇制成每1ml含40～60μg的溶液。

(2)供试品溶液的制备:取风寒感冒颗粒研细，取约2～5g，精密称定，精密加入30～100％甲醇50～100ml，称定重量，超声处理30～60分钟，待溶液冷却至室温，用30～100％甲醇补重，摇匀，用0.22～0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

(3)色谱条件：采用ZORBAX SB-C18色谱柱(柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm)；流动相为以乙腈-0.1％磷酸溶液为3～70：97～30的混合溶液；体积流量0.5～1.5ml/min；DAD检测器，波长为190～250nm；柱温25～45℃，理论板数均不低于10000。

(4)测定：分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各5～20μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到风寒感冒颗粒的HPLC特征图谱。

本发明的HPLC特征图谱的最佳构建方法如下：(一下技术方案中记载的各物质的用量或用量范围，旨在表明各物质间的用量比例关系，并不限定在记载的具体数量上)

优选地，步骤(1)所述参照物溶液浓度为每1ml50％甲醇含50μg葛根素对照品。