[发明专利]细胞分离装置以及细胞分离方法

权利要求书

1.一种细胞分离装置，其特征在于，包括内管和外管，所述内管的开口端设有向外延伸的凸缘以让所述内管套设在所述外管的开口端，所述内管的底部与所述外管的底部之间设有预设距离，用于容纳进入到所述外管中的未被三维抗体网捕获的单细胞，所述内管的底部为多孔结构，用于分离所述未被三维抗体网捕获的单细胞和被三维抗体网捕获的细胞；所述未被三维抗体网捕获的单细胞可通过所述多孔结构进入到所述外管，所述被三维抗体网捕获的细胞随三维抗体网一起被所述多孔结构截留在所述内管；

所述的三维抗体网由生物相容性高的高分子材料分散在水中形成的三维立体网状结构和偶联到所述三维立体网状结构的抗体组成；

所述生物相容性高的高分子材料是一种三维培养基质，可以分散在水溶液中形成三维立体网结构，该网状结构不改变液体的流动性；

当样本加入到三维抗体网中，特定类型的细胞会被三维抗体网上的抗体捕获，捕获后的细胞与抗体网形成较大的交联结构，离心时无法通过多孔结构而被截留，在多孔结构的上层即可收获到特定类型的细胞。

2.如权利要求1所述的细胞分离装置，其特征在于，所述生物相容性高的高分子材料包括改性胶原、改性聚糖或小分子高聚物。

3.如权利要求1所述的细胞分离装置，其特征在于，所述偶联方式包括物理吸附或共价结合。

4.如权利要求1所述的细胞分离装置，其特征在于，所述三维立体网状结构的孔径为30-1000μm。

5.如权利要求4所述的细胞分离装置，其特征在于，所述三维立体网状结构的孔径为50-500μm。

6.如权利要求5所述的细胞分离装置，其特征在于，更优选地所述三维立体网状结构的孔径为100-300μm。

7.如权利要求1所述的细胞分离装置，其特征在于，所述多孔结构的孔径为20-100μm。

8.如权利要求7所述的细胞分离装置，其特征在于，所述多孔结构的孔径为30-70μm。

9.如权利要求1所述的细胞分离装置，其特征在于，所述多孔结构包括筛网或筛板。

10.一种利用如权利要求1-9任一细胞分离装置的细胞分离方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、制备生物样本的单细胞悬液；

S2、生物相容性高的高分子材料偶联抗体，制备三维抗体网溶液；

S3、将制备的三维抗体网溶液和单细胞悬液先后加入到细胞分离装置的内管中，颠倒混匀，室温孵育；

S4、离心处理，被三维抗体网捕获的细胞留在内管中，未被三维抗体网捕获的单细胞进入到了外管中；

所述的三维抗体网由生物相容性高的高分子材料分散在水中形成的三维立体网状结构和偶联到所述三维立体网状结构的抗体组成；

所述生物相容性高的高分子材料是一种三维培养基质，可以分散在水溶液中形成三维立体网结构，该网状结构不改变液体的流动性；

当样本加入到三维抗体网中，特定类型的细胞会被三维抗体网上的抗体捕获，捕获后的细胞与抗体网形成较大的交联结构，离心时无法通过多孔结构而被截留，在多孔结构的上层即可收获到特定类型的细胞。

11.如权利要求10所述的细胞分离方法，其特征在于，在步骤S3中所述室温孵育的时间为20-60min；在步骤S4中所述离心处理的离心力为250-800g，所述离心处理的离心时间为10-30min。

12.如权利要求10-11任一所述的细胞分离方法在外周血单个核细胞中T淋巴细胞的富集、外周血单个核细胞中CD45+细胞的去除或全血中循环肿瘤细胞的富集的应用。