[发明专利]辐照降解赭曲霉毒素的方法在审
申请号: | 201610984216.5 | 申请日: | 2016-11-09 |
公开(公告)号: | CN106721926A | 公开(公告)日: | 2017-05-31 |
发明(设计)人: | 哈益明;靳婧;范家霖;迟蕾;李庆鹏;王锋;陈云堂;郭芹;崔龙 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院农产品加工研究所 |
主分类号: | A23L5/20 | 分类号: | A23L5/20;A23L5/30 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙)11369 | 代理人: | 史霞 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 辐照 降解 曲霉 毒素 方法 | ||
1.一种辐照降解赭曲霉毒素的方法,其特征在于,包括:
步骤一、将待降解样品用清水淋洗,烘干至其含水量≤10%,研磨成粒径为20mm的颗粒,置于体积浓度为70%的乙醇溶液中,浸泡2h后,水浴温度为30℃下,水浴超声5min;
步骤二、采用γ辐照经步骤一处理后的待降解样品,辐照剂量为4kGy;
步骤三、检测经步骤二处理后的待降解样品中的赭曲霉毒素A的浓度,若待降解样品中的赭曲霉毒素A的浓度≤5μg/Kg,则待降解样品合格;若待降解样品中的赭曲霉毒素A的浓度>5μg/Kg,则采用γ辐照待降解样品,辐照剂量为5~10kGy,直至待降解样品中的赭曲霉毒素A的浓度≤5μg/Kg。
2.如权利要求1所述的辐照降解赭曲霉毒素的方法,其特征在于,所述步骤一中,乙醇溶液的体积与待降解样品的体积比为3:1。
3.如权利要求1所述的的辐照降解赭曲霉毒素的方法,其特征在于,所述步骤三中,若待降解样品中的赭曲霉毒素A的浓度>5μg/Kg,则采用γ辐照待降解样品,辐照剂量为6kGy。
4.如权利要求1所述的的辐照降解赭曲霉毒素的方法,其特征在于,所述步骤三中,若待降解样品中的赭曲霉毒素A的浓度>5μg/Kg,则采用γ辐照待降解样品,辐照剂量为10kGy。
5.如权利要求1所述的的辐照降解赭曲霉毒素的方法,其特征在于,所述步骤三中,检测经步骤二处理后的待降解样品中的赭曲霉毒素A的浓度,具体为:
a、分别采用体积浓度为50%的甲醇溶液配制浓度为1μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml、40μg/ml和100μg/ml的标准赭曲霉毒素A溶液,采用高效液相色谱检测标准赭曲霉毒素A溶液,建立赭曲霉毒素A浓度与峰面积的标准曲线;
b、称取20g经过步骤三辐照后的待降解样品,置于烘干装置中,在温度为70℃下,烘干1h,加入5g氯化钠和75mL提取液,搅拌,过滤,得到第一滤液,量取10mL第一滤液,将量取的第一滤液用水稀释至50mL,得到第二滤液,过滤第二滤液,直至其澄清;
c、将赭曲霉毒素A免疫亲和柱与固相萃取装置连接,向将赭曲霉毒素A免疫亲和柱中加入10mL第二滤液,将真空泵与固相萃取装置连接,调节压力,使赭曲霉毒素A免疫亲和柱中液体流速为1滴/s,当空气进入赭曲霉毒素A免疫亲和柱时,依次用10mL真菌清洗缓冲液和10mL水淋洗,直至空气再次进入赭曲霉毒素A免疫亲和柱时,弃去全部由赭曲霉毒素A免疫亲和柱中流出液体,抽干赭曲霉毒素A免疫亲和柱中溶液;
d、向赭曲霉毒素A免疫亲和柱中加入1mL洗脱液,流速为1滴/s,收集洗脱液,用甲醇溶液定容为1mL,采用高效液相色谱测定,根据a中建立的赭曲霉毒素A浓度与峰面积的标准曲线和高效液相色谱测出的待降解样品中赭曲霉毒素A的峰面积,计算出经步骤二处理后的待降解样品中的赭曲霉毒素A的浓度,其中,洗脱液为甲醇溶液。
6.如权利要求5所述的辐照降解赭曲霉毒素的方法,其特征在于,所述b中,提取液的制备为:
将150g氯化钠、20g碳酸氢钠溶于950mL水中,加入水定容至1mL,即得到提取液。
7.如权利要求5所述的辐照降解赭曲霉毒素的方法,其特征在于,所述c中,真菌清洗缓冲液的制备为:
将25g氯化钠、5.0g碳酸氢钠溶于200mL水中,摇匀,加入0.1g吐温-20,加入水定容至1mL,即得到真菌清洗缓冲液。
8.如权利要求1所述的辐照降解赭曲霉毒素的方法,其特征在于,待降解样品为受赭曲霉毒素A污染的玉米或玉米制品。
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