[发明专利]一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法

说明书

本发明公开一种烟草及烟草制品中马来酰肼截留量的检测方法，所述烟草及烟草制品包括烟叶和卷烟烟丝，包括以下步骤：配制标准溶液、盐酸回流提取、分散固相萃取纯化、UPLC‑MS/MS分析测定。本发明针对烟草抑芽剂马来酰肼，利用超高效液相色谱‑串联质谱仪（UPLC–MS/MS），建立UPLC–MS/MS快速分析烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的方法。选取的串联质谱，分离度和灵敏度都明显高于标准方法（YC/T 405.5‑2011）的紫外检测器。

技术领域

本发明属于农药残留检测领域，涉及烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法。

背景技术

马来酰肼又名抑芽单，是一种植物生长调节剂，烟草生产中常用其抑制烟草侧芽生长，国外应用比较广泛。由于其在烟草大田生长期的长期多次施用，从而会导致其在初烤烟叶中的残留, 烟叶中马来酰肼的残留会对吸烟者产生健康风险，国际烟草科学研究合作中心（CORESTA）将其纳入烟草农药指导性残留限量名单118名单）。

烟草中马来酰肼残留量的分析方法主要有分光光度法（ISO4876-1980），高效液相色谱法（HPLC，YC/T405.5-2011）、气相色谱法（GC）和胶束液相色谱（MLC），烟草行业目前应用较为广泛的测定烟草中马来酰肼残留量的方法为HPLC-UV法（YC/T405.5-2011），此方法选取紫外检测器，灵敏度较低，方法的前处理非常复杂，且选取的是外标法定量，方法的准确度相对较低，容易出现假阳性检出现象。因此，准确定量分析烟草及烟草制品中马来酰肼具有较为重要的意义。

发明内容

鉴于此，本发明目的在于提供一种准确定量检测马来酰肼的方法，特别是测定烟草及烟草制品中马来酰肼的方法。

发明人通过长期的探索和尝试，以及多次的实验和努力，不断的改革创新，为解决以上技术问题，本发明提供的技术方案是，提供一种烟草及烟草制品中马来酰肼截留量的检测方法，所述烟草及烟草制品包括烟叶和卷烟烟丝，包括以下步骤：

步骤a）配制标准溶液；

准确称取马来酰肼标准品, 精确至0.0001g，用超纯水溶解定容，制得标准储备液；

稀释标准储备液得到标准工作液，储存于棕色玻璃瓶中，冷冻保存备用；

用超纯水准确配置氘代内标标准储备液，储存于棕色玻璃瓶中，冷冻保存；

取一定量的内标标准储备液，用超纯水稀释定容，制得内标标准工作液；

标准工作液和内标标准工作液冷藏保存；

步骤b）盐酸回流提取；

称取试样于圆底烧瓶中，加入盐酸提取液，再加入内标标准工作液；将圆底烧瓶放置于加热套或者油浴锅中，圆底烧瓶上安装球形冷凝管，加热回流；控制回流速度，使蒸汽升至球形冷凝管第二球处，回流稳定后开始计时；

步骤c）分散固相萃取纯化；

从圆底烧瓶中移取上清液于旋盖离心管中，分别向离心管中加入N-丙基乙二胺吸附剂，漩涡振荡混合，吸取上清液经有机相滤膜过滤后用超纯水稀释定容待测；

步骤d）UPLC-MS/MS分析测定；

分别对前述工作液进行UPLC-MS/MS分析，并对各标样峰面积与内标的峰面积的比值（y）和其浓度（x）进行线性回归分析，得到标准曲线；

色谱条件：Atiantis UPLC HSS T3超高效液相色谱柱，柱长100 mm，内径2.1mm，粒径1.8μm；流动相A：体积分数为0.1%的甲酸水溶液，流动相B：体积分数为0.1%的甲酸乙腈溶液；流速0.45 mL/min；柱温45 °C；进样量2 µL；