[发明专利]一种基于肿瘤细胞与肿瘤相关成纤维细胞的3D共培养模型

权利要求书

1.一种基于肿瘤细胞与肿瘤相关成纤维细胞的3D共培养模型，其特征在于，基于甲基纤维素的3D细胞共培养方法，采用3D细胞培养基的成分为含有10％的胎牛血清，0.24％的甲基纤维素的DMEM/F12培养基，将细胞消化后，含有2500个细胞的100μL3D细胞培养基加入未经过组织处理的96孔圆底板，细胞即刻开始自发聚集，三天后形成致密的球状立体结构。

2.按权利要求1所述的基于肿瘤细胞与肿瘤相关成纤维细胞的3D共培养模型，其特征在于，所述的3D细胞培养基的成分为含有10％的胎牛血清，0.24％的甲基纤维素的DMEM/F12培养基。

3.按权利要求1所述的基于肿瘤细胞与肿瘤相关成纤维细胞的3D共培养模型，其特征在于，所述的将细胞消化后，含有2500个细胞的100μL3D细胞培养基加入未经过组织处理的96孔圆底板。

4.基于肿瘤细胞与肿瘤相关成纤维细胞的3D共培养模型的构建方法，其特征在于，其包括，将人胰腺癌细胞系Capan-1用含10％胎牛血清的DMEM培养基置于37℃、5％CO2的培养箱中培养；人原代胰腺星状细胞用含10％胎牛血清的DMEM/F12培养基置于37℃、5％CO2的培养箱中培养；将Capan-1细胞系用绿色荧光蛋白GFP病毒侵染标记，将胰腺星状细胞用红色荧光蛋白RFP标记，分别检测两种细胞的侵染效率；取对数生长期的细胞，将含有1250个Capan-1细胞和1250个胰腺星状细胞的100μL3D细胞培养基加入未组织处理的96孔圆底板；后续进行缺氧微环境的检测，两种细胞共培养的荧光状态。

5.按权利要求4所述的的构建方法，其特征在于，将筛选的一种对肿瘤细胞和肿瘤相关成纤维细胞均有增殖抑制效果的药物，以及一种选择性抑制肿瘤细胞的药物以及一种选择性抑制肿瘤相关成纤维细胞的药物，将其加入3D共培养体系内，应用于药物研究。