[发明专利]一种辽刺参低聚肽对小鼠抗疲劳作用的研究方法在审
申请号: | 201610998706.0 | 申请日: | 2016-11-14 |
公开(公告)号: | CN108066741A | 公开(公告)日: | 2018-05-25 |
发明(设计)人: | 黄祥贤 | 申请(专利权)人: | 大连豪翔生物酶工程有限公司 |
主分类号: | A61K38/01 | 分类号: | A61K38/01;A61P39/00;G01N30/02;G01N33/48 |
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地址: | 116200 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 刺参 低聚肽 小鼠抗疲劳 血清尿素氮 肝糖原 灌胃 小鼠 负重 生物技术领域 大豆低聚肽 昆明种小鼠 剂量选择 精深加工 生理盐水 市场提供 药物资源 游泳实验 漂洗 抗疲劳 断颈 滤纸 酶解 吸干 肝脏 分组 游泳 海洋 检测 研究 开发 | ||
1.一种辽刺参低聚肽对小鼠抗疲劳作用的研究方法,其特征在于:所述的研究方法具体步骤如下:
(1)先对辽刺参低聚肽分子量进行检测:将样品送江南大学分析测试中心依据GB/T22729-2008采用高效凝胶过滤色谱法分析肽段分子量;
(2)实验分组及灌胃剂量选择:选择昆明种小鼠240只,雄性,体重20±2g,随机分为8组,每组30只,每组小鼠做如下处理:10只用于小鼠负重游泳,10只用于测定血清尿素氮,10只用于测定肝糖原,将8组小鼠进行以下试验分组,分别为阴性对照组;辽刺参低聚肽高剂量组;辽刺参低聚肽中剂量组;辽刺参低聚肽低剂量组;大豆低聚肽中剂量组;大豆低聚肽低剂量组;辽刺参粉高剂量组;辽刺参粉低剂量组;采用人体推荐用量的20倍、10倍和5倍分别作为高、中、低剂量组的灌胃剂量,依次为0.5g/kg、0.17g/kg、0.085g/kg,其中阴性对照组灌胃蒸馏水,各组小鼠每日灌胃1次,连续灌胃30d;
(3)负重游泳实验:末次灌胃30min后,在小鼠尾部负7%体重的铅皮,放入水温25℃的游泳箱,游泳箱尺寸为100cm×100cm×80cm,水深不低于30cm,用秒表记录小鼠自游泳开始至溺亡的时间;
(4)血清尿素氮的测定:末次灌胃30min后,将小鼠置于温度为30℃的游泳箱中不负重游泳90min,休息60min将小鼠拔眼球采全血约0.5mL,血中不加抗凝剂,放置到4℃的冰箱中保存约3h,待血凝固后于离心机中在2000r/min下离心15min,取血清测定血尿素氮含量;
(5)肝糖原的测定:末次灌胃30min后,采用断颈法将小鼠处死,取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干,测定其肝糖原含量。
2.根据权利要求1所述的一种辽刺参低聚肽对小鼠抗疲劳作用的研究方法,其特征在于:所述的辽刺参低聚肽的处理方法:将辽刺参经过脱盐、斩碎、磨浆处理后加入复合蛋白酶酶解,再通过脱色、脱腥、去离子等工艺分离得到的分子量在1000道尔顿以下的肽粉。
3.根据权利要求1所述的一种辽刺参低聚肽对小鼠抗疲劳作用的研究方法,其特征在于:所述的大豆低聚肽的处理方法为:将非转基因食用豆粕经过复合蛋白酶酶解之后再通过脱苦、脱腥等工艺分离得到的分子量在1000道尔顿以下肽粉。
4.根据权利要求1所述的一种辽刺参低聚肽对小鼠抗疲劳作用的研究方法,其特征在于:所述的辽刺参粉的制备方法为:取干辽刺参,粉碎,过60目筛即可。
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