[发明专利]一种具有抗肿瘤作用的化合物

说明书

(6R,7R)‑7‑[[2‑[2‑(氨基甲基)苯基]乙酰]氨基]‑3‑[[1‑(羧甲基)四唑‑5‑基]硫甲基]‑8‑氧代‑5‑硫杂‑1‑氮杂双环[4.2.0]辛‑2‑烯‑2‑羧酸或其可药用盐作为抗肿瘤药物、用于制备抗肿瘤药物的应用或者用于治疗肿瘤疾病。

技术领域

本发明涉及具有下列式I结构的化合物或其可药用盐作为抗肿瘤药物、用于制备抗肿瘤药物的应用或者用于治疗肿瘤疾病。

背景技术

式I化合物的系统命名为(6R,7R)-7-[[2-[2-(氨基甲基)苯基]乙酰]氨基]-3-[[1-(羧甲基)四唑-5-基]硫甲基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸，其国际药品通用名(INN)为Ceforanide(以下简称化合物I)。化合物I或其药用盐为beta-内酰胺类的头孢菌素，用于抗微生物的治疗，本发明中化合物I被发现具有新颖的抗肿瘤作用。

TOPK是英文“T-LAK细胞来源的蛋白激酶”(T-LAK cell-originated proteinkinase)的缩写，是2000年Abe等发现的丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(J Biol Chem 2000，275(28):21525-21531)。现已证明，TOPK与Gaudet等于同年发现的(Proc Natl Acad Sci USA2000，97(10):5167-5172)激酶PBK(PDZ-binding kinase，PBK)是同一物质，因此也称为PBK/TOPK。人体内的TOPK由322个氨基酸构成、相对分子质量约为40kD。TOPK在多种恶性肿瘤细胞中呈高表达，不仅调控着肿瘤细胞的有丝分裂和细胞周期，并且参与了肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡过程，因此据信有可能成为肿瘤治疗的一个重要靶点(Br J Cancer,2010,102(1):151-161；Cancer Res,2012,72(12):3060-3068)。

发明内容

化合物I具有新颖的抗肿瘤作用，此特性被发现于本发明人等进行的抗肿瘤药物试验中。最初，在受体-配体结合筛选试验中发现化合物I具有良好的TOPK结合特性，实验得到其与TOPK蛋白结合的平衡解离常数Kd值为17.8±4.13(μM)。

在此基础上，本发明人等进行了进一步的细胞及动物试验研究，包括：(1)对结肠癌细胞(HCT116)抑制作用的研究，通过制备细胞悬液，接种于孔板中，经37℃培养后，加入不同浓度的化合物I，再经37℃培养箱中培养后，检测其对HCT116的IC50，得到化合物I对于高表达TOPK的结肠癌细胞(HCT116)的细胞抑制作用IC50值为72.25μM；(2)对下游激酶histone H3磷酸化抑制，通过细胞内信号通路实验，采用用结肠癌细胞HCT116，分为化合物I实验组和对照组，经药物作用后，收取蛋白样品，进行Western Blot实验，结果显示化合物I能够抑制细胞内下游激酶histone H3磷酸化；(3)动物实验，将接种了HCT116细胞的荷瘤裸鼠随机等分为对照组和化合物I高剂量组及低剂量组，每隔两天称重；从第7天开始每两天测量肿瘤大小，连续给药14天后将裸鼠处死，量取肿瘤组织，测量实验组和对照组肿瘤块。在各测量天数，和对照组相比，治疗组的肿瘤体积显著缩小，提示肿瘤生长受到明显抑制。在实验终点，治疗高剂量组肿瘤体积平均值为161.1381±44.6623mm3,对照组肿瘤体积平均值为301.1599±61.1094mm3，缩小了46.5％，表明化合物I对HCT116移植肿瘤有确切抑制作用。

本发明证实了化合物I具有抗肿瘤活性，最终实现了本发明。

附图说明

图1化合物I抑制HCT116细胞内下游激酶histone H3磷酸化