[发明专利]菌根真菌在金线莲大面积栽培技术

权利要求书

1.一种应用菌根真菌大面积栽培金线莲的方法，其特征在于：包括步骤：

(1)菌根真菌的发酵培养

将4种菌根真菌MD-1，MO-1，MO-2，MA-1自低温保藏的斜面试管菌种活化后，分别转接于含PDA培养基的平皿中，于22-28℃恒温培养10-20天，分别在菌落边缘打孔成菌片，并以小碎块接入液体培养基中进行发酵培养；

由平皿固体菌种转接液体培养的MD-1，MO-1，MO-2和MA-1真菌可以直接使用，也可以作为种子菌种，种子菌种再进一步接入液体或固体培养基进行放大培养；

真菌液体培养的培养基含有葡萄糖、无机盐类成分和天然添加物，真菌用三角瓶或其他容器振荡或发酵罐通气暗培养，培养结束后可直接使用或用匀浆机打碎培养产物备用；

真菌固体培养的培养基含有天然纤维性或淀粉性物质，真菌用试管、玻璃罐头瓶或塑料袋等器皿静置暗培养，待菌丝大部分或全部长满培养基时取出备用；

(2)金线莲苗的培养

金线莲带有节的茎段经过金线莲芽分化、金线莲丛芽增殖、壮苗生根培养等步骤的培养，用玻璃三角瓶或玻璃罐头瓶等器皿静置光照培养，培育成苗；经壮苗生根培养后的金线莲苗可以在继代培养基上继代培养；

金线莲芽增殖、金线莲丛芽增殖、壮苗生根等步骤所用的培养基是以MS培养基为基本培养基；苗的继代培养所用的培养基是以1/2MS培养基为基本培养基；以上培养基都需要在基本培养基的基础上添加蔗糖、肌醇、琼脂，或添加活性炭，添加不同种类和浓度的植物激素，或添加马铃薯提取物；

(3)金线莲苗与菌根真菌的共生栽培、田间管理和收获

金线莲苗与菌根真菌大面积共生栽培的栽培基质含有蛭石、泥炭土、腐殖土、砂子；

金线莲苗和菌根真菌按以下方法共生栽培：

①地上遮阳栽培：在具有遮阳网的露天大棚，或塑料薄膜温室，或玻璃温室中进行栽培，栽培时先在金线莲苗根的基部放置适量碎树叶，再在金线莲苗根部放置以上备好的液体或固体菌根真菌适量，最后用栽培基质埋住金线莲苗的根部；

②立体遮阳栽培：在地上搭架分层立体栽培，在硬质材料的盆或盒等容器的底部平铺一层共生栽培基质，栽培时先在金线莲苗根的基部放置适量碎树叶，再在金线莲苗根部放置以上备好的液体或固体菌根真菌适量，最后用栽培基质埋住金线莲苗的根部；

在金线莲生长的过程中可以根据需要补施液体或固体菌根真菌；

金线莲苗出瓶后与菌根真菌共生栽培6-12个月后即可收获。

2.如权利要求1的方法，其特征在于：小菇属4种菌根真菌液体培养的培养基中葡萄糖的加入量按重量计为1.5-4％；无机盐类成分可以为硫酸镁，磷酸二氢钾，或磷酸氢二钾，或磷酸二氢钾和磷酸氢二钾以任意比例混合的混合物，其加入量按重量计为硫酸镁0.1-0.5％，磷酸二氢钾0.1-0.5％，或磷酸氢二钾0.1-0.5％，或磷酸二氢钾和磷酸氢二钾的混合物0.1-0.5％；天然添加物可以为麦麸(煮汁)，其加入量按重量计为2-5％；培养基pH5.0-6.5；三角瓶或其他容器振荡培养或发酵罐通气培养，培养容器装量10-60％；培养基灭菌后接入上述4种小菇属真菌，种子菌种接种量为培养容器装量的5-20％；液体培养的培养条件为：振荡转速80-150转/分钟，18-28℃暗培养10-30天；培养结束后可直接使用或用匀浆机打碎培养产物备用。

3.如权利要求1和2所述的方法，其特征在于：小菇属4种菌根真菌固体培养的培养基中天然纤维性或淀粉性物质可以为阔叶树锯末、麦麸和碎玉米粒，这3种原料加入量之间的比例按重量计为：阔叶树锯末∶麦麸∶碎玉米粒＝0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.2-1.5；固体培养基的加水量为以上3种原料总重量的1-4倍；培养基pH5.0-6.5；试管、玻璃罐头瓶或塑料袋等器皿静置培养，培养容器装量50-80％；培养基灭菌后接入液体培养的小菇属真菌的种子菌种，种子菌种的接种量为培养容器装量的5-15％；固体培养的培养条件为：18-28℃暗培养，待菌丝从培养基顶部长入底部或长满培养基时取出备用。