[发明专利]一种测定鱼饲料中姜黄素含量的方法

说明书

本发明公开了一种测定鱼饲料中姜黄素含量的方法，其步骤：A、取鱼饲料于离心管中，加入试剂A，振荡，超声，离心；B、转移提取液，再向原离心管中加入试剂A重复提取一次，合并提取液于125 mL旋转浓缩瓶中，浓缩至干；C、向旋转浓缩瓶中加入试剂B复溶旋转浓缩瓶中的残渣；D、转移复溶液至离心管中，氮气吹干；E、向离心管中加入溶液C和试剂D，振荡，离心，取下层液体过滤，UPLC‑TUV测定，采用鱼饲料基质标准曲线计算鱼饲料中双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素的含量。该方法操作简单、快速、准确、灵敏度高、易于推广。适于测定鱼饲料中双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素的含量。

技术领域

本发明属于分析测试领域，更具体涉及一种测定鱼饲料中双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素含量的UPLC-TUV方法，它适用于测定鱼饲料中双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素的含量。

背景技术

姜黄素，别名姜黄色素，包括双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素，具有保护肠粘膜、抗氧化、抗炎、抑菌、降血脂、保肝、利胆等药理活性，3种成分的生理活性也有所不同，姜黄素的抗氧化活性大于去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素，去甲氧基姜黄素降血脂的活性明显高于姜黄素，双去甲氧基姜黄素在利胆及对内皮细胞生长的抑制作用方面，较去甲氧基姜黄素和姜黄素活性强。有研究表明，姜黄素在促进鱼类生长、提高鱼类消化酶活性和抗氧化力、增强免疫功能及改善肌肉品质和鱼体色泽方面具有一定作用：在鱼饲料中添加姜黄素可显著提高罗非鱼、虹鳟和草鱼的抗氧化能力；姜黄素可以促进大黄鱼的生长、增强大黄鱼皮肤与肌肉的着色；饲料中添加姜黄素可以显著提高草鱼肠道中蛋白酶和淀粉酶的活性，促进鱼体对营养物质的吸收；饲料中添加4％～6％的姜黄素还能够预防鱼肠炎病、小瓜虫病、赤皮病等疾病。由此可见姜黄素作为添加剂在鱼饲料中使用具有较好的应用前景和实用性，为有效测定鱼饲料中双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素3种成分各自的含量，建立一种有效的方法测定鱼饲料中双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素的含量是非常必要的。

目前，国内外未见有关鱼饲料中双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素含量测定方法的报道或申请专利。

发明内容

本发明目的是在于提供了一种测定鱼饲料中双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素含量的方法。该测定方法所用试剂价格便宜，操作方便快捷，测定方法的准确性和灵敏度高，分析时间短。适于快速准确测定鱼饲料中双去甲氧基姜黄素、甲氧基姜黄素和姜黄素的含量。

为了实现上述的目的，本发明采用以下技术措施：

一种测定鱼饲料中姜黄素含量的方法，其步骤是：

A、鱼饲料(通威黄颡鱼配合饲料1号)中双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素采用试剂A(15-30mL)提取，经旋转蒸发仪(予华YRE2000E)将试剂挥干；

B、再经试剂B(1～10mL)复溶旋转蒸发后的残渣，将复溶溶液转移到一支10mL塑料离心管中置40℃氮吹仪(大森DS-K200型)上氮吹至干，向10mL塑料离心管中加入1mL定容溶液C溶解塑料管中的残渣；

C、再加入1mL试剂D，涡旋振荡30s，7000r/min离心5min，将上层液体弃去；

D、用1mL注射器吸取下层液体过0.22μm聚醚砜水系滤头，过滤液(溶解有双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素的溶液C，1mL)放置到2mL进样瓶(Waters，12×32mm，带盖)中，超高效液相色谱紫外法(UPLC-TUV)测定。获得双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素的色谱图，通过色谱图积分得出双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素的峰面积。