[发明专利]一种同时生产木耳多糖和黑色素的方法

权利要求书

1.一种同时生产木耳多糖和黑色素的方法，其特征在于：

1）菌种活化：将处于保藏状态的黑木耳菌株在斜面培养基上活化；

2）摇瓶种子培养：将活化后的黑木耳菌株在摇瓶种子培养基中扩大培养，装液系数为0.15~0.25，回旋培养；

3）发酵培养：将发酵罐进行空消，加入发酵培养基，进行实消，实消结束后接入步骤2）得到的菌种，发酵，发酵结束后离心分离木耳菌菌丝体和发酵清液；

4）分离纯化木耳黑色素：浓缩步骤3）所得发酵清液，调节发酵清液pH，离心收集沉淀，冷冻干燥所得沉淀；

5）分离纯化木耳多糖：浓缩步骤4）所得上清液，加乙醇初步沉淀，离心得上清液，再次用乙醇沉淀，将所得沉淀冷冻干燥；

所述的发酵培养基成份及其重量份为：30~60份葡萄糖，35~70份玉米淀粉，2~5份酪氨酸，0.06~1.5份GP消泡剂，1~3份姜黄素，5~10份海藻多糖、1~5份越橘提取物和0.001~0.01份花生四烯酸；

所述的步骤3）菌种接种量为发酵培养基体积的5~10%，发酵温度为32~45℃，发酵罐压力为0.03~0.06MPa，搅拌转速为100~150 r/min，通风量为1：0.5~1:1v/v/m，发酵时间为96~144h；

所述的摇瓶种子培养基成份及其重量份为：10~30份葡萄糖，20~35份牛肉提取物，0.75~1.5份K₂HPO₄，0.75~1.5份KH₂PO₄，0.5~1份MgSO₄，1~3份CaCO₃，1~4份NaCl，5~10份酵母提取物，2~3份柠檬酸钠，1~4份蜂胶提取物、5~8份大豆分离蛋白和0.01~0.1份山梨坦三油酸酯；

所述的步骤5）中初步沉淀所用乙醇浓度为25~35%，第二次沉淀所用乙醇浓度为65~80%，65~80%的乙醇中溶有0.002~0.004%氯化铁和0.004~0.008%氯化镁；

所述黑木耳菌株为保藏编号为CGMCC No .9711的黑木耳菌（Auricularia auricula）菌株。

2.根据权利要求1所述的一种同时生产木耳多糖和黑色素的方法，其特征在于：所述的斜面培养基成份及其重量份为：40~70份土豆汁，20~40份琼脂，10~15份葡萄糖，2~5份甘草提取物，1~4份姜黄素、0.05~0.15份醋酸钠和0.01~0.1份十二烷基二甲基甜菜碱。

3.根据权利要求1所述的一种同时生产木耳多糖和黑色素的方法，其特征在于：所述的步骤2）回旋培养的转速为150~200r/min，培养温度24~30℃，pH为5.7~6.5，培养时间72~120h。

4.根据权利要求1所述的一种同时生产木耳多糖和黑色素的方法，其特征在于：所述的步骤3）空消温度100~130℃，时间为20~40min，之后待罐温降至50~60℃时，再加入发酵液，加入后进行实消，实消温度110~115℃，时间20~40min。