[发明专利]一种猪细小病毒病活疫苗用稀释液

权利要求书

1.一种猪细小病毒病活疫苗用稀释液，其特征在于每1000ml PH=7的磷酸盐缓冲液中由双花连翘提取物1-5g、枸杞多糖5-10g 、黄芪皂苷Ⅱ 20-80mg和聚肌胞1-5g组成；

所述双花连翘提取物的提取由以下步骤制得：按1:1的重量称取金银花和连翘，混合，加入10-12倍量50-60%的乙醇，超声提取10-15min，收集提取液，重复提取3次，将所得提取液混合，蒸发浓缩，冻干，即可得双花连翘提取物；

所述枸杞多糖的制备由以下步骤制得：

（1）将枸杞置于60℃恒温箱中干燥至恒重，粉碎备用；

（2）预处理：称取步骤（1）中粉碎后的枸杞，用90%乙醇回流1h，弃去溶剂，收集残渣，将残渣风干备用；

（3）微波提取：称取步骤（2）中所制备的枸杞残渣，按料液比为1：8-15加入蒸馏水，以300-350W的功率微波提取5-10min，离心，去除沉淀，收集上清液；

（4）浓缩步骤（3）中所得上清液，再利用95%乙醇进行沉淀，将所得沉淀溶解于重蒸水，用Sevag法脱蛋白，脱蛋白步骤重复5次，得粗多糖溶液；

（5）向步骤（4）中所得粗多糖溶液中加入1%的木瓜蛋白酶，在60℃、pH=6.0的条件下酶解3h，干燥，即可得精制枸杞多糖。

2.根据权利要求1所述的一种猪细小病毒病活疫苗用稀释液，其特征在于每1000ml PH=7的磷酸盐缓冲液中包含：双花连翘提取物2-4g、枸杞多糖6-8g 、黄芪皂苷Ⅱ 30-60mg和聚肌胞2-3g。

3.根据权利要求1所述的一种猪细小病毒病活疫苗用稀释液，其特征在于每1000ml PH=7的磷酸盐缓冲液中包含：双花连翘提取物3g、枸杞多糖7.5g 、黄芪皂苷Ⅱ 50mg和聚肌胞2.5g。

4.根据权利要求1或2或3所述的一种猪细小病毒病活疫苗用稀释液，其特征在于所述pH=7的磷酸盐缓冲液的制备方法如下：

a．称取下列原料组分：氯化钠6-10g、氯化钾0.05-0.5g、磷酸氢二钠1-1.2g、磷酸二氢钾0.05-0.5g、氯化钙0.05-0.2g和六水氯化镁0.05-0.2g，混合均匀备用；

b．向步骤a中所得原料组分的混合物中加入1000mL的双蒸水，充分溶解后，在116℃条件下高压灭菌30min，即得pH=7的磷酸盐缓冲液。