[发明专利]一种紫外荧光分子探针的合成及其对亚硝酸根的检测

权利要求书

1.一种紫外荧光分子探针3-二甲氨基苯基-4-氨基-N-丁基-1,8-萘二甲酸亚胺的合成方法，其步骤是：

a．将甲苯、乙醇、超纯水加入到圆底烧瓶中混合摇匀，将混合溶剂在-70摄氏度的液氮中冷冻，抽真空至真空度0.08 MPa，将圆底烧瓶放在室温下，置换氩气，解冻，溶剂溶解后再次放入液氮中冷冻，抽真空，置换氩气，上述步骤再重复一次，将溶剂中的溶解氧除净，溶液保存在氩气氛围下，作为下一步反应的溶剂；

b．向带有回流冷凝管装置的两口圆底烧瓶中加入3-溴-4-氨基-N-丁基-1,8-萘二甲酸亚胺，碳酸钾和3-（N,N-二甲基氨基）苯基硼酸盐酸盐，在催化剂四三苯基膦钯条件下，密封接口处，氩气保护，将上述除净氧的溶剂用注射器注入烧瓶，90摄氏度回流36 h，反应结束后，将体系冷却至室温，减压浓缩溶剂得到粗产品，粗产品通过硅胶柱柱层析，层析液二氯甲烷和甲醇体积比为50:1，洗脱，分离得到紫外荧光分子探针——3-二甲氨基苯基-4-氨基-N-丁基-1,8-萘二甲酸亚胺。

2.用权利要求1所合成紫外荧光分子探针3-二甲氨基苯基-4-氨基-N-丁基-1,8-萘二甲酸亚胺检测各类水和肉类样品中的亚硝酸根，其步骤是：

a．将紫外荧光分子探针3-二甲氨基苯基-4-氨基-N-丁基-1,8-萘二甲酸亚胺，溶于1mol/L的盐酸溶液，用紫外吸收光谱和荧光发射光谱分别测定紫外荧光分子探针3-二甲氨基苯基-4-氨基-N-丁基-1,8-萘二甲酸亚胺的吸收和发射光谱，经测定，其紫外吸收最大波长为445 nm处，最强荧光发射在540 nm处；向其中加入亚硝酸根，1分钟后，生成11-正丁基-2-二甲氨基-10H-苯基甲酰[c]异喹啉[4,5-gh]邻二氮萘-10,12(11H)-二酮，其紫外吸收最大波长为550 nm处，最强荧光发射在600 nm处；

紫外荧光分子探针3-二甲氨基苯基-4-氨基-N-丁基-1,8-萘二甲酸亚胺可以在紫外-可见吸收和荧光发射两种模式下对NO₂^﹣进行定量分析；

b．将紫外荧光分子探针3-二甲氨基苯基-4-氨基-N-丁基-1,8-萘二甲酸亚胺，溶于的盐酸溶液，向其中加入浓度为0-400 μM的亚硝酸根，1分钟后，生成11-正丁基-2-二甲氨基-10H-苯基甲酰[c]异喹啉[4,5-gh]邻二氮萘-10,12(11H)-二酮，观察其颜色变化，同时用紫外吸收光谱和荧光发射光谱检测，记录其在550 nm处的紫外吸强度和600 nm处的荧光发射强度，根据亚硝酸根的浓度和紫外吸收光谱的强度建立标准曲线，其方程为y = 0.01 +0.011 × [NO₂^﹣], R = 0.992，检出限LOD, S/N = 3以达到0.39 μM ，σ = 0.00144，同时，根据亚硝酸根的浓度和荧光发射光谱的强度建立标准曲线，其方程为y = 69.65 + 10.91× [NO₂^﹣], R = 0.993，检出限LOD, S/N = 3，可以达到52 nM ，σ = 0.19；

c．将紫外荧光分子探针3-二甲氨基苯基-4-氨基-N-丁基-1,8-萘二甲酸亚胺，溶于盐酸溶液，向其中加入各类含有亚硝酸根的水和肉类样品，1分钟后，生成11-正丁基-2-二甲氨基-10H-苯基甲酰[c]异喹啉[4,5-gh]邻二氮萘-10,12(11H)-二酮，观察其颜色变化，同时用紫外吸收光谱和荧光发射光谱检测含有亚硝酸根的水和肉类样品在紫外吸收光谱550nm处的吸收强度，用荧光发射光谱检测样品在荧光发射光谱600 nm的发射强度，并根据线性方程计算样品中的亚硝酸根含量。