[发明专利]制备富血小板血浆PRP的方法及该富血小板血浆的用途

权利要求书

1.从血液中提取富血小板血浆的方法，其包括以下步骤：

(a)使采集的全血置于含有抗凝剂的容器中，使血液和抗凝剂充分混匀；

(b)使混有抗凝剂的血液置于离心管中，进行第一次离心，使血液分成三层；

(c)将最上层和大部分的中间层抽出并转移到新的离心管中，混合均匀，进行第二次离心；

(d)弃掉离心管上层的血浆，利用剩余的血浆使沉淀的血小板重新悬浮，即得富血小板血浆；

其特征在于：

步骤(a)中，抗凝剂选自乙二胺四乙酸及其盐、枸橼酸钠、枸橼酸葡萄糖溶液、或其组合，在所述抗凝剂中还补充添加了氯化镁和酒石酸钾钠两种试剂，以其用于每1ml血液抗凝计两种试剂用量分别是50μg和100μg。

2.根据权利要求1的方法，步骤(a)中所述全血是新鲜的全血。

3.根据权利要求1的方法，步骤(a)中所述全血是受试个体的全血，所述受试个体选自是患者或者健康志愿者。

4.根据权利要求1的方法，其中乙二胺四乙酸的盐选自：乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸二钾、乙二胺四乙酸钙钠。

5.根据权利要求1的方法，乙二胺四乙酸或其盐的用量是每0.5~1.5mg用于1ml血液抗凝。

6.根据权利要求1的方法，枸橼酸钠的用量是每3~5mg用于1ml血液抗凝。

7.根据权利要求1的方法，枸橼酸葡萄糖溶液包含：枸橼酸0.48g、枸橼酸钠1.32g、葡萄糖1.47g、加水至100ml，每1ml血液抗凝使用该枸橼酸葡萄糖溶液0.15~0.2ml。

8.根据权利要求1的方法，步骤(a)中所述容器是离心管或是采血袋。

9.根据权利要求1的方法，步骤(a)中还包括在使血液和抗凝剂混均后取适量用于测定其中血液中血小板的数量，以便用于后续的过程比照、监控。

10.根据权利要求1的方法，步骤(b)中分成三层，最上层是含血小板的血浆层，中间一层是血块黄层，最底层的是红细胞层。

11.根据权利要求1的方法，步骤(b)中离心的转速为2000 rpm ~ 3000 rpm。

12.根据权利要求1的方法，步骤(b)中离心的转速为2300 rpm ~ 2500 rpm，时间为3-5min。

13.根据权利要求1的方法，步骤(b)中离心的转速为2400 rpm，时间为4 min。

14.根据权利要求1的方法，步骤(c)中离心的转速为1400 rpm~1600 rpm，时间为18-22min。

15.根据权利要求1的方法，步骤(c)中所得上层和大部分中间层经混匀后，其中血小板的浓度是分离前全血中血小板浓度的1-5倍。

16.根据权利要求1的方法，步骤(c)中所得上层和大部分中间层经混匀后，其中血小板的浓度是分离前全血中血小板浓度的2.5-3.5倍。

17.根据权利要求1的方法，步骤(c)中还包括在使抽取的最上层和中间层混合均匀后，取适量用于测定其中的血小板的数量，以便用于后续的过程比照、监控。

18.根据权利要求1的方法，步骤(d)中，所述弃掉离心管上层的血浆是指弃掉离心管上层至少2/4的血浆。