[发明专利]制备富血小板血浆PRP的方法及该富血小板血浆的用途

说明书

本发明涉及制备富血小板血浆PRP的方法及该富血小板血浆的用途。具体地说，本发明涉及从血液中提取富血小板血浆的方法，其包括以下步骤：(a)使采集的全血置于含有抗凝剂的容器中，使血液和抗凝剂充分混匀；(b)使混有抗凝剂的血液置于离心管中，进行第一次离心，使血液基本上分成三层；(c)将最上层和大部分的中间层抽出并转移到新的离心管中，混合均匀，进行第二次离心；(d)弃掉离心管上层的血浆，利用剩余的血浆使沉淀的血小板重新悬浮，即得富血小板血浆。本发明还涉及本发明方法制备得到的富血小板血浆，以及其在制备健康产品中的用途，例如用于骨科、口腔科、颌面外科、运动医学以及美容医学。

技术领域

本发明属临床医学技术领域，具体涉及一种制备富含血小板的血浆的方法，更特别涉及一种以获得具有高浓度血小板、高血小板回收率等一个或多个方面的优点的富血小板血浆的制备方法。本发明还涉及由本发明方法制备得到的此种制备富血小板血浆PRP，以及由本发明此种方法制备的富血小板血浆PRP在制备健康产品中的用途。例如，所述的健康产品应用于骨科、口腔科、颌面外科、运动医学以及美容医学。

背景技术

富含血小板的血浆，在本领域通常亦可称为富血小板血浆(Platelet RichPlasma，PRP)，其是通过离心人或动物自身的全血而得到的含高体积分数血小板的血浆。自从上世纪80年代David R.Knighton等人发现血小板细胞能促进血管增生、胶原合成后，人们便致力于将富血小板血浆(PRP)应用于临床，渴望解决修复能力低下的器官组织的损伤修复问题。但由于当时PRP制备困难，限制了其在临床上的推广。

经过几十年的研究，已探索出几种较为合适的富血小板血浆制备方法：手工法(一次离心法、二次离心法和三次离心法)及设备制备法。其中，二次离心法的PRP的提取率最高，在临床的应用也最广。利用二次离心法制备PRP的原理如下：(1)抽取静脉血液并将其注入含抗凝剂的试管内；(2)第1次离心可将血液分为3层，最底端的部分为约占血液总体积分数55％的红细胞；顶端部分为约占总体积分数40％的贫血小板血浆(platelet-poorplasma，PPP)，主要是纤维蛋白原等血浆成分；中间层为仅占总体积分数5％的血小板浓缩物(platelet concentrate，PC)，即俗称的黄衣层；(3)用移液器吸取PPP和PC以及紧邻PC的部分红细胞，并将其注入另一不含抗凝剂的试管中；(2)以一定的速度和时间再次将其离心并将血浆分为3层，最底端是少量剩余的红细胞，顶端是约占总体积分数80％的PPP，两层之间即富集的血小板；(5)用移液器抽取大部分的PPP，并留取足够的血清来容纳悬浮于其中的富集的血小板，得到PRP。另外，PRP中的血小板在体外较脆弱且容易激活，过高的离心速度会使血小板膜破裂降低其生物活性，而较低的离心速度可使血小板活性在制备过程中保持在最低水平，因此离心时速度不宜过快。而且，在不同的离心次数、离心力和离心时间所制备出的PRP中，血小板的体积分数以及各种生长因子的量和活性各不相同。

目前虽能制备出成分较为单一、浓度达标的PRP，但其制备技术仍未完全成熟，大多数人推崇的二次离心法存在着操作复杂、过程漫长、产品污染的风险。我国某公司上市的PRP设备存在着PRP中血小板浓度不高的缺陷，而在美国已经上市的PRP设备，其PRP中血红蛋白浓度未公开，因此可能存在着血小板细胞浓度高但纯度不高的缺陷，而且各个上市的PRP设备，其价格相当昂贵，在临床应用推广方面受到较大限制，尤其在发展中国家的应用。目前，解决PRP制备问题的方法仍值得进一步探究，以得到一种方便快捷、纯度及浓度高、价格低廉的制备方法。