[发明专利]一种环己酮单加氧酶及其应用

权利要求书

1.一种将奥美拉唑硫醚催化转化成埃索美拉唑的环己酮单加氧酶，其特征在于，所述环己酮单加氧酶的氨基酸序列选自：SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:17。

2.编码根据权利要求1所述的环己酮单加氧酶的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列选自：编码氨基酸序列SEQ ID NO:3的SEQ ID NO:4；编码氨基酸序列SEQ ID NO:5的SEQ ID NO:6；编码氨基酸序列SEQ ID NO:7的SEQ ID NO:8；编码氨基酸序列SEQ ID NO:9的SEQ ID NO:10；编码氨基酸序列SEQ ID NO:11的SEQ ID NO:12；编码氨基酸序列SEQ IDNO:13的SEQ ID NO:14；编码氨基酸序列SEQ ID NO:15的SEQ ID NO:16；编码氨基酸序列SEQ ID NO:17的SEQ ID NO:18。

3.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体携带根据权利要求2所述的基因。

4.一种基因工程菌株，其特征在于，所述基因工程菌株携带根据权利要求2所述的基因。

5.根据权利要求4所述的基因工程菌株，其特征在于，所述基因工程菌株为重组大肠杆菌基因工程菌株。

6.根据权利要求5所述的基因工程菌株，其特征在于，所述重组大肠杆菌基因工程菌株采用以下方法构建：以根据权利要求2所述的基因为模板，通过在该基因两端加Nde I和BamH I内切酶片段进行PCR扩增扩展，并利用Nde I和BamH I内切酶位点将该基因插入至pET28a质粒中，连接获得携带该基因的表达载体，然后将该表达载体转入大肠杆菌BL21中，即构建获得携带所述基因的重组大肠杆菌基因工程菌株。

7.根据权利要求6所述的基因工程菌株，其特征在于，所述PCR扩增扩展的引物如下：

正向引物F1：GGAATTCCATATGAGTACCAAGATGGATTTTGATGC；

反向引物R1：CGCGGATCCTTACGCATTAGCCTGCTGTTTGG。

8.一种将奥美拉唑硫醚催化转化成埃索美拉唑的方法，其特征在于，向反应体系中加入根据权利要求1所述的环己酮单加氧酶，或者携带根据权利要求1所述的环己酮单加氧酶的基因工程菌株，然后将奥美拉唑硫醚底物催化转化成埃索美拉唑。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述奥美拉唑硫醚底物的浓度高达165g/L。