[发明专利]运用核酸适配体与溶菌酶特异性识别并形成G四链体进行荧光显现潜指纹的方法有效
| 申请号： | 201611082336.2 | 申请日： | 2016-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN106645062B | 公开（公告）日： | 2019-03-19 |
| 发明（设计）人： | 刘晓娟;盖盼盼;李峰 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 青岛发思特专利商标代理有限公司 37212 | 代理人： | 巩同海;刘娜 |
| 地址： | 266109 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 潜指纹 核酸适配体 样品表面 荧光显现 溶菌酶 四链体 潜在指纹显现 纹路 特异性识别 成像清晰 充分混合 高效快速 缓冲溶液 快速清洗 去离子水 荧光分子 荧光检测 荧光显色 指纹图案 指纹图像 紫外光源 溶液滴 扦插 刑侦 配制 指纹 照射 相机 黑暗 保存 清晰 应用 | ||
1.一种运用核酸适配体与溶菌酶特异性识别并形成G四链体进行荧光显现潜指纹的方法，其特征在于，包括以下步骤：
①按捺指纹：在样品表面获得汗潜指纹；
②配制荧光显色溶液：将DNA溶解于包含NaCl、MgCl2和KCl的Tris-HCl缓冲溶液中，然后加入NMM溶液充分混合；
③荧光显现潜指纹：将步骤②得到的溶液滴涂到步骤①的潜指纹样品表面反应后，用去离子水快速清洗干燥后的样品，于黑暗处在紫外光源下照射，即可获得纹路清晰的指纹图案，通过相机获得该指纹图像；
所述DNA序列为AP 1：5’-TgggTATgTCTTT
2.根据权利要求1所述的一种运用核酸适配体与溶菌酶特异性识别并形成G四链体进行荧光显现潜指纹的方法，其特征在于，所述步骤①中样品为玻璃、锡箔、塑料或金属片。
3.根据权利要求1或2所述的一种运用核酸适配体与溶菌酶特异性识别并形成G四链体进行荧光显现潜指纹的方法，其特征在于，所述荧光显色溶液中DNA和NMM的摩尔比为1:5～1:8。
4.根据权利要求1或2所述的一种运用核酸适配体与溶菌酶特异性识别并形成G四链体进行荧光显现潜指纹的方法，其特征在于，所述DNA浓度为10～50μM，所述NMM的浓度为50～300μM，所述Tris-HCl缓冲溶液的浓度为30～50mM，加入NaCl的浓度为150～250mM、MgCl2为5～15mM、KCl为40～60mM。
5.根据权利要求4所述的一种运用核酸适配体与溶菌酶特异性识别并形成G四链体进行荧光显现潜指纹的方法，其特征在于，所述荧光显色溶液中DNA和NMM的摩尔比为1:6，所述DNA浓度为30μM，所述Tris-HCl缓冲溶液的浓度为40mM。
6.根据权利要求1所述的一种运用核酸适配体与溶菌酶特异性识别并形成G四链体进行荧光显现潜指纹的方法，其特征在于，所述步骤③中反应时间为30～60min。
7.根据权利要求1所述的一种运用核酸适配体与溶菌酶特异性识别并形成G四链体进行荧光显现潜指纹的方法，其特征在于，所述步骤③中紫外光源的波长为300～400nm。
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