[发明专利]运用核酸适配体与溶菌酶特异性识别并形成G四链体进行荧光显现潜指纹的方法有效

专利信息
申请号: 201611082336.2 申请日: 2016-11-30
公开(公告)号: CN106645062B 公开(公告)日: 2019-03-19
发明(设计)人: 刘晓娟;盖盼盼;李峰 申请(专利权)人: 青岛农业大学
主分类号: G01N21/64 分类号: G01N21/64
代理公司: 青岛发思特专利商标代理有限公司 37212 代理人: 巩同海;刘娜
地址: 266109 *** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 潜指纹 核酸适配体 样品表面 荧光显现 溶菌酶 四链体 潜在指纹显现 纹路 特异性识别 成像清晰 充分混合 高效快速 缓冲溶液 快速清洗 去离子水 荧光分子 荧光检测 荧光显色 指纹图案 指纹图像 紫外光源 溶液滴 扦插 刑侦 配制 指纹 照射 相机 黑暗 保存 清晰 应用
【说明书】:

发明涉及潜在指纹显现技术领域,具体的说是一种运用核酸适配体与溶菌酶识别,形成G四链体扦插荧光分子进行荧光检测潜指纹的方法。所述包括以下步骤:①按捺指纹:在样品表面获得汗潜指纹;②配制荧光显色溶液:将DNA溶解于包含NaCl、MgCl2和KCl的Tris‑HCl缓冲溶液中,然后加入NMM溶液充分混合;③荧光显现潜指纹:将步骤②得到的溶液滴涂到步骤①的潜指纹样品表面反应后,用去离子水快速清洗干燥后的样品,于黑暗处在紫外光源下照射,即可获得纹路清晰的指纹图案,通过相机获得该指纹图像。该方法具有操作简单,成本低廉、高效快速、成像清晰易保存等优点,在刑侦领域具有较大的应用前景。

技术领域

本发明涉及潜在指纹显现技术领域,具体的说是一种运用核酸适配体与溶菌酶识别,形成G四链体扦插荧光分子进行荧光检测潜指纹的方法。

背景技术

指纹,由于遗传物质、皮肤组织结构、病理和外伤影响等多种因素决定了指纹纹线具有特定性、多样性、稳定性,能够通过对指纹纹线的分析、识别、鉴定达到对人员身份进行鉴别和认定。指纹检测是个人身份识别较可靠的方法之一,公安部门借助指纹鉴定可以证实犯罪和某些犯罪方式,在相关的刑事侦查工作中有重大现实意义。通常指纹在捺印之后,留在客体表面的物质较少,约为0.11mg,其中99%的水分会迅速蒸发,剩余约l%的物质中,约50%为氯化钠、氯化钾等无机物,它们几乎对指纹显现没有价值;只有剩下的油脂、氨基酸等有机成分与荧光物质作用后才能达到指纹显现的目的,因此寻找与指纹有机残留物作用灵敏度高的试剂是提高指纹显现率和清晰度的一项重要工作。根据显现原理的不同,潜在指纹显现方法可以分为以下三大类:物理吸附法、化学显现法、光学显现法。物理吸附法由于吸附物质和被显现物质之间的结合相对不稳定,显现的纹线易被破坏,易形成一些对人体有危害的粉尘。常见的化学显现法有硝酸银法、茚三酮法、“502”胶法、DFO法等。但是由于其原理是显现标记物与指印中的一些无机物质发生反应,而此类无机物质并非指印特有且不稳定,所以其显现出的指纹不易客观真实的反应指纹自身特征。光学显现法对指纹的增强显现能力有限,无法独立解决所有实践中遇到的问题,而且很多情况下,光学显现所需设备昂贵,无法普及。纳米材料应用到潜指纹显现领域也得到了初步探索,多种纳米材料已经被成功应用到潜指纹显现领域中,但是显现潜指纹的纳米技术还存在制备过程复杂,费用高等问题,不可能大量的应用于社会实践中,因此还需要探索新的方法用于潜指纹的显现。

发明内容

本发明的目的是提供一种运用核酸适配体与溶菌酶特异性识别并形成G四链体进行荧光显现潜指纹的方法,该方法具有操作简单,成本低廉、高效快速、成像清晰易保存等优点。

一种运用核酸适配体与溶菌酶特异性识别并形成G四链体进行荧光显现潜指纹的方法,包括以下步骤:

①按捺指纹:在样品表面获得汗潜指纹;

②配制荧光显色溶液:将DNA溶解于包含NaCl、MgCl2和KCl的Tris-HCl缓冲溶液中,然后加入NMM溶液充分混合;

③荧光显现潜指纹:将步骤②得到的溶液滴涂到步骤①的潜指纹样品表面反应后,用去离子水快速清洗干燥后的样品,于黑暗处在紫外光源下照射,即可获得纹路清晰的指纹图案,通过相机获得该指纹图像。

所述步骤①中样品为玻璃、锡箔、塑料或金属片。

所述DNA序列为AP1:5’-TgggTATgTCTTTATCAgggCTAAAgAg-3’和AP2:5’-TgCAgAgTTACTTAgTTTgACATgggTAgggCggg-3’。其中,横线部分的两段DNA序列合起来是溶菌酶的适配体序列,而斜体部分的两部分序列合起来是G四链体的序列。

所述荧光显色溶液中DNA和NMM的摩尔比为1:5~1:8。

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