[发明专利]用于DNA分离的毛细管柱及其制备方法有效
申请号: | 201611099996.1 | 申请日: | 2016-12-05 |
公开(公告)号: | CN106754243B | 公开(公告)日: | 2019-11-26 |
发明(设计)人: | 李永新;黎源倩 | 申请(专利权)人: | 四川大学 |
主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00;C08F120/56 |
代理公司: | 11371 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 李进<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
地址: | 610000 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 石英毛细管柱 毛细管柱 第一混合物 改性 制备 冲洗 四甲基乙二胺 硅烷偶联剂 丙烯酰胺 分离效果 过硫酸铵 使用寿命 制备周期 重现性 分析 维护 | ||
1.一种用于DNA分离的毛细管柱的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
用1.0-5.0mg/ml的硅烷偶联剂对石英毛细管柱进行第一次冲洗,得改性石英毛细管柱;
用第一混合物对所述改性的石英毛细管柱进行第二次冲洗,得所述用于DNA分离的毛细管柱;其中,所述第一混合物由丙烯酰胺的水溶液、过硫酸铵的水溶液以及四甲基乙二胺的水溶液混合所得,所述第一混合物中,丙烯酰胺的终浓度为10-40mg/ml、过硫酸铵的浓度为0.5-3.0mg/ml和四甲基乙二胺的浓度为0.5-2.0mg/ml;所述丙烯酰胺、所述过硫酸铵和所述四甲基乙二胺的溶剂均经除氧处理;
其中,于制备所述改性石英毛细管柱步骤之前还包括对所述石英毛细管柱进行预处理步骤,所述预处理步骤将初始毛细管柱用0.1mol/L NaOH溶液冲洗,除去管内碱溶性杂质以及将管壁硅氧键打开形成硅羟基,接着用0.1mol/L HCl溶液冲洗管柱除去管内酸溶性杂质,并用纯水冲洗。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述硅烷偶联剂选自甲基三甲氧基硅烷、三甲基氯硅烷和十八烷基三氯硅烷中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述硅烷偶联剂为甲基三甲氧基硅烷。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述第一次冲洗于遮光条件下进行12h-24h。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述第二次冲洗进行时间为12h-24h。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述第一次冲洗于18-28℃条件下进行。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述第二次冲洗于18-28℃条件下进行。
8.一种用于DNA分离的毛细管柱,其特征在于,其由权利要求1-7任意一项所述的制备方法制得。
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