[发明专利]用于DNA分离的毛细管柱及其制备方法有效
申请号: | 201611099996.1 | 申请日: | 2016-12-05 |
公开(公告)号: | CN106754243B | 公开(公告)日: | 2019-11-26 |
发明(设计)人: | 李永新;黎源倩 | 申请(专利权)人: | 四川大学 |
主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00;C08F120/56 |
代理公司: | 11371 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 李进<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
地址: | 610000 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 石英毛细管柱 毛细管柱 第一混合物 改性 制备 冲洗 四甲基乙二胺 硅烷偶联剂 丙烯酰胺 分离效果 过硫酸铵 使用寿命 制备周期 重现性 分析 维护 | ||
本发明提供一种用于DNA分离的毛细管柱及其制备方法,涉及DNA分离分析技术领域。该制备方法包括以下步骤:用1.0‑5.0mg/ml的硅烷偶联剂对石英毛细管柱进行第一次冲洗,得改性石英毛细管柱;用第一混合物对改性的石英毛细管柱进行第二次冲洗,得用于DNA分离的毛细管柱;其中,第一混合物包括终浓度为10‑40mg/ml的丙烯酰胺、0.5‑3.0mg/ml的过硫酸铵和0.5‑2.0mg/ml的四甲基乙二胺。该方法制备周期较短并具有较好的重现性。由该方法制得的DNA分离的毛细管柱,其使用寿命长,维护简单,分离效果佳。
技术领域
本发明涉及一种DNA分离分析技术领域,且特别涉及一种用于DNA分离的毛细管柱及其制备方法。
背景技术
毛细管电泳往往发生在内径为20-100微米的石英毛细管柱内,石英毛细管内壁含有大量的硅羟基,其具有一定的疏水性并且在较宽的pH范围内带有负电荷,影响毛细管电泳最终结果的准确性。毛细管涂层技术是解决这一问题的一个有效方法。但现有的商品化涂层毛细管柱维护繁琐,且使用一段时间过后,往往导致柱效降低、峰拖尾、峰缺失、结果重现性差,甚至管柱的寿命短。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于DNA分离的毛细管柱,其使用寿命长,维护简单,分离效果佳。
本发明的另一目的在于提供一种用于DNA分离的毛细管柱制备方法,其制作过程简单,均可在室温下完成,且制备周期较短,方法具有较好的重现性,且制得的用于DNA分离的毛细管柱结果重现性佳。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
本发明提出一种用于DNA分离的毛细管柱的制备方法,包括以下步骤:用1.0-5.0mg/ml的硅烷偶联剂对石英毛细管柱进行第一次冲洗,得改性石英毛细管柱。
用第一混合物对改性的石英毛细管柱进行第二次冲洗,得用于DNA分离的毛细管柱,其中,第一混合物包括终浓度为10-40mg/ml的丙烯酰胺、0.5-3.0mg/ml的过硫酸铵和0.5-2.0mg/ml的四甲基乙二胺。
本发明实施例的用于DNA分离的毛细管柱及其制备方法的有益效果是:石英毛细管内壁含有大量的硅羟基,利用硅烷偶联剂对石英毛细管柱进行改性。丙烯酰胺、过硫酸铵和四甲基乙二胺反应,形成聚丙烯酰胺,而改性后的石英毛细管柱与聚丙烯酰胺发生化学键的键和反应,从而使得石英毛细管柱内壁具有一层牢固的聚丙烯酰胺,其不易脱落,且通过合理的配比,使其效果最优化,且聚丙烯酰胺均匀的分布于该石英毛细管柱的内壁,由于聚丙烯酰胺不带电荷,所以制得的管柱电渗流较小,且其会形成可用于DNA的高效分离的筛孔,因此该用于DNA分离的毛细管柱分离效果佳。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案,下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍,应当理解,以下附图仅示出了本发明的某些实施例,因此不应被看作是对范围的限定,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1本发明提供的用于DNA分离的毛细管柱第一天首次使用测定结果色谱图;
图2本发明提供的用于DNA分离的毛细管柱第三天使用测定结果色谱图;
图3本发明提供的用于DNA分离的毛细管柱第五天使用测定结果色谱图;
图4本发明提供的用于DNA分离的毛细管柱第六天使用测定结果色谱图。
图5本发明提供的对比例商品化毛细管柱第一天首次使用测定结果色谱图;
图6本发明提供的对比例商品化毛细管柱第三天使用测定结果色谱图;
图7本发明提供的对比例商品化毛细管柱第五天使用测定结果色谱图;
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