[发明专利]二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-双叶酸及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇2000‑双叶酸及其制备方法；本发明首先合成1,2‑二硬酯酰‑SN‑甘油‑3‑磷酰乙醇胺‑聚乙二醇‑N‑羟基丁二酰亚胺，通过氨基己二酸与活化的端氨基叶酸相连，即合成了双叶酸分子的脂质。本发明还提供二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇2000‑双叶酸在制备双叶酸靶向超声造影剂中的应用。二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇2000‑双叶酸能显著提高超声造影剂乳腺癌MCF‑7的靶向结合能力。

技术领域

本发明属于化学与医学的交叉领域，特别涉及一种二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-双叶酸及其制备方法和在制备超声造影剂中的应用。

背景技术

乳腺癌在妇女中的发病率和死亡率较高，全球每年约500,000人死于乳腺癌。乳腺癌的早期检测和确诊有利于及时选择相应的治疗，降低死亡率，是大家极力追求的研究目标。

随着超声分子成像技术和生物纳米技术的迅猛发展，纳米级超声造影剂发展迅速，具有较高散射特性，能显著增强超声检测信号的物质。与传统超声造影剂(血池显像剂)不同，纳米级超声造影剂具有很强的穿透力，能穿过血管壁，其开发和应用还有利于进一步发展靶向性、高效性、小型化且具有辅助治疗作用的新型超声造影剂。而靶向纳米级超声微泡造影剂的出现使病变的靶向成像成为可能，是超声分子影像学发展的重要标志。

近年来研究表明：肿瘤组织在生长过程中较正常组织需要更多的叶酸，叶酸受体在绝大多数正常组织中几乎不表达，而在大部分癌细胞上表达异常升高。报告显示：卵巢癌、子宫内膜癌、乳腺癌、结肠癌、鼻咽癌上的叶酸受体都呈显著高水平表达；而高度未分化的转移性癌表达的叶酸受体水平比非转移性癌还要高。叶酸靶向纳泡(NB)能显著提高纳泡与叶酸受体高表达的肿瘤细胞的被动结合能力。叶酸与肿瘤表面叶酸受体特异性的结合能力与以下两种因素有关：1)不同肿瘤组织细胞表面叶酸受体的量；2)载体上连接的叶酸的含量。目前报道的用于针对叶酸受体的靶向方法有两种：一种是利用如mAb Mov18的单克隆抗体，但由于mAb Mov18具备较强的免疫原性，以及抗体一微泡复合物分子量大,组织穿透力弱等局限，限制了其发展；另一种是用叶酸本身，叶酸相对比较稳定、廉价且不易产生副作用，因此应用比较广泛。PEG2000具备良好的生物相容性、无毒亲水，是作为基团连接最常见的高分子聚合物之一。

现有技术中未发现将L-2-Aminoadipic acid氨基己二酸作为中间连接基团，使更多的叶酸与脂质DSPE表面连接，从而实现纳泡在肿瘤靶部位的富集。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-双叶酸(DSPE-PEG2000-AD-(FOL)₂)及其制备方法；本发明还提供二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-双叶酸在制备双叶酸靶向超声造影剂中的应用。

本发明的技术方案为：

一、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-双叶酸

二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-双叶酸，具有如下所示的结构：

二、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-双叶酸的制备

二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-双叶酸的制备方法，制备路线如下：

(1)合成1,2-二硬酯酰-SN-甘油-3-磷酰乙醇胺-聚乙二醇2000-N-羟基丁二酰亚胺；

(2)合成1,2-二硬酯酰-SN-甘油-3-磷酰乙醇胺-聚乙二醇-氨基己二酸；

(3)合成端氨基叶酸；