[发明专利]一种HPLC手性固定相及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种HPLC手性固定相及其制备方法和应用，以单分散性良好的二氧化硅微球为原料，感光高分子重氮树脂为表面改性剂，将β‑环糊精/聚丙烯酸复合物接到二氧化硅微球表面，然后借助紫外光，将重氮树脂与硅羟基之间的氢键、重氮树脂与β‑环糊精/聚丙烯酸复合物之间的氢键转化为共价键，从而使β‑环糊精稳定的接到微球表面。本发明采用的感光高分子重氮树脂，与传统硅烷偶联剂相比，具有无毒害，易合成，环境友好性等特点，制得的经修饰的硅球手性固定相在高效液相色谱中对多种手性药物对应体实现了基线分离，展现出优异手性拆分能力，可应用于多种手性色谱柱填料领域。

技术领域

本发明属于色谱分离技术领域，具体涉及一种利用感光高分子聚合物重氮树脂在二氧化硅微球表面修饰环糊精进行改性的HPLC手性固定相及其制备方法和应用。

背景技术

随着社会的进步与发展，人们逐渐认识到手性药物与生活息息相关，而手性药物在医药市场的份额也逐年攀升。随着人们对手性药物需求的急剧增加，建立快速的手性分离方法，对药代动力学研究和手性药物产品质量控制都具有十分重要的意义。目前，色谱法已成为光学拆分最有用的方法。这些方法包括气相色谱法，薄层色谱法，超临界流体色谱法，毛细管电泳，逆流色谱，离心分配色谱法，高效液相色谱法(HPLC)。高效液相色谱凭借着其高效、高灵敏度、分析速度快、运用范围广等优势成为手性分离领域一项重要技术。

液相色谱法手性拆分依据其原理可分为手性衍生法、手性流动相法和手性固定相法。手性固定相法是基于样品与固定相表面的手性选择剂形成暂时的非对映体配合物的能量差异或稳定性不同而达到手性分离，是不经过转变成非对映体的直接拆分的方法。手性固定相拆分法的优点是制备方便，能适用于各类化合物的拆分。手性固定相法是目前最具优势的光学异构体拆分方法。

在手性色谱分离中，一种理想的手性固定相应具备以下优点：分离范围广，适应多种结构类型的对映体分离；分析速度快，分离速率高，能快速、准确测定对映体的纯度；分离具有特定性；分离选择性和柱容量较高，具有制备分离能力。在过去的几年中，大量的手性固定相得到了开发与应用，已合成的商品手性固定相多达上百种，但迄今为止，还没有一种手性固定相能同时满足上述各方面的要求。

β环糊精(Cyclodextrins，βCD)是由一定数量的葡萄糖单元通过α-1，4-糖苷键连接而成的环状分子。分子整体上具有环内疏水和环外亲水的特性和较强的手性识别能力而在手性药物的分离中占有比较重要的地位。Armstrong等率先通过烷基化、酰基化和氨基甲酸酯化，增加了新的手性识别位点，使环糊精类固定相的手性色谱性能有较大的提高。而用不同的衍生化试剂对βCD的羟基进行修饰，可以提高键合相与手性分子之间的作用力，扩大应用范围。环糊精类色谱固定相一般是将βCD或其衍生物键合到硅胶基质上，硅胶先经过硅烷化试剂预处理，常用的硅烷化试剂有γ-氨丙基三乙氧基硅烷(KH550)、y-缩水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷(KH560)和γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷(KH570)。βCD 经过修饰后，常连有氨基、羟基、烯基或环氧基官能团，可与硅烷化硅胶键合；也有采用硅烷化试剂将βCD衍生化，再在无水条件下与硅胶的硅羟基反应，即将βCD连接到硅胶基质上。

CN103601823A公开了一种β开环糊精手性固定相的制备方法，以SiO₂微球为原料，通过γ-氨丙基三乙氧基硅烷(KH550)，三甲基氯硅烷，4,4’-二苯基甲烷二异氰酸酯(MDI)，将β-环糊精键合到SiO₂微球表面，得到一种β-环糊精手性固定相。CN104841408A公开了一种环糊精手性固定相及其制备方法与应用，通过点击反应制备巯基-乙烯基键合环糊精手性固定相手性色谱填料，通过对环糊精6位的选择性改性和硅胶的巯基化处理，利用高效催化剂通过点击反应进而制备化学稳定性优异的巯基-乙烯基键合的环糊精手性固定相。以上两种方法在制备环糊精手性固定相时均使用了硅烷偶联剂，而改性过程中常用的硅烷偶联剂往往具有一定的毒性并且对水敏感，需要控制在无水条件下使用，相对苛刻，而且过程繁琐，耗时较长；另外，这些因素会引起环境污染等问题，大大限制了其应用。

发明内容