[发明专利]用于预防宫腔粘连及子宫内膜损伤修复的细胞制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种用于预防宫腔粘连及修复子宫内膜损伤的细胞制剂，其特征在于，所述的细胞制剂由间充质干细胞、人重组基质细胞衍生因子-1α(rhSDF-1α)和用于承载间充质干细胞及rhSDF-1α的透明质酸钠凝胶组成，所述的间充质干细胞为脐带间充质干细胞或胎盘间充质干细胞。

2.根据权利要求1所述的细胞制剂，其特征在于：

所述的间充质干细胞的来源为人脐带或胎盘；

所述的细胞制剂中，间充质干细胞的浓度为5×10⁶～2×10⁸个/mL；

所述的间充质干细胞为原代-第10代的间充质干细胞；

所述的细胞制剂中，rhSDF-1α的质量浓度为10-150ng/mL；

所述的细胞制剂中，透明质酸钠凝胶的质量浓度为10-100mg/mL；

所述的透明质酸钠凝胶的分子量为400000-1000000；

所述的透明质酸钠凝胶为医用透明质酸钠凝胶。

3.根据权利要求2所述的细胞制剂，其特征在于，所述的间充质干细胞为原代-第3代的间充质干细胞。

4.根据权利要求2所述的细胞制剂，其特征在于，所述的细胞制剂为混悬液。

5.如权利要求1-4所述的细胞制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)制备脐带或胎盘间充质干细胞；

2)将所述脐带或胎盘间充质干细胞与rhSDF-1α和透明质酸钠凝胶按比例混合，制得。

6.根据权利要求5所述的细胞制剂的制备方法，其特征在于，所述的脐带间充质干细胞的制备方法，包括如下步骤：

1)取志愿、健康合格孕妇的足月剖宫产的新生儿脐带，充分洗涤去除脐动静脉中的血管；

2)将脐带组织剪成块状，加入胶原酶消化液，37℃恒温摇床中振荡消化，完全培养基(DMEM)和10％胎牛血清(FBS)终止消化；

3)50目筛网过滤人脐带组织消化后的产物；

4)将收集的过滤液离心、分离获得单个核细胞；

5)将离心后获得单个核细胞重悬于完全培养基(DMEM+10％FBS)，接种于培养皿中，在37℃，体积分数为5％CO₂培养箱中培养；

6)待细胞生长至80-90％融合度时，用胰酶消化进行传代培养，即得脐带间充质干细胞；必要时进行冻存待用。

7.根据权利要求5所述的细胞制剂的制备方法，其特征在于，所述的胎盘间充质干细胞的制备方法，包括如下步骤：

1)取志愿、健康合格孕妇的足月剖宫产胎儿的胎盘，PBS反复冲洗去除胎盘血；

2)将胎盘组织剪成块状，加入胶原酶消化液，37℃恒温摇床中振荡消化，完全培养基(DMEM+10％FBS)终止消化；

3)50目筛网过滤人胎盘组织消化后的产物；

4)将收集的过滤液离心、分离获得单个核细胞；

5)将离心后获得单个核细胞重悬于完全培养基(DMEM+10％FBS)，接种于培养皿中，在37℃，体积分数为5％CO₂培养箱中培养；

6)待细胞生长至80-90％融合度时，用胰酶消化进行传代培养，即得胎盘间充质干细胞；必要时进行冻存待用。