[发明专利]岩白菜素的偶联物及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201611136271.5 | 申请日： | 2016-12-07 |
| 公开（公告）号： | CN108164598B | 公开（公告）日： | 2021-09-03 |
| 发明（设计）人： | 郗日沫;邓川;尹永梅;孟萌;李小刚;龙浩 | 申请（专利权）人： | 南开大学 |
| 主分类号： | C07K14/795 | 分类号： | C07K14/795;C07K1/107;C07K16/44;C07K16/06 |
| 代理公司： | 杭州敦和专利代理事务所(普通合伙) 33296 | 代理人： | 郭莹 |
| 地址： | 300350 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 岩白菜素 偶联物 及其 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.岩白菜素的偶联物和岩白菜素特异反应抗体用于制备岩白菜素的酶联免疫检测试剂盒的用途，
所述的岩白菜素的偶联物的结构通式如(I)：
其中，n为与一个钥匙孔蓝蛋白结合的岩白菜素的分子个数，KLH为钥匙孔蓝蛋白(Keyhole Limpet Hemocyanin)，分子量范围是450KDa～13000KDa；
所述的岩白菜素的偶联物的制备方法包括：
(1)溶液A的制备：将10.0mg岩白菜素，9.88mg N，N′-羰基二咪唑(CDI)，0.37mg 4-二甲氨基吡啶(DMAP)以摩尔比1∶2∶0.1溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，反应生成岩白菜素与N，N′-羰基二咪唑的活性中间体，备用；
(2)溶液B的制备：将30mg KLH溶于10ml 0.01M磷酸盐缓冲溶液(PBS)中，备用；
(3)在室温下，将溶液A逐滴加入到不断搅拌状态下的溶液B中，反应6h，得溶液C；
(4)溶液C转移到透析袋中，用上述磷酸缓冲液搅拌透析72h，之后更换用蒸馏水透析20～30h，每6h更换一次透析液，透析过程在4℃下进行；
(5)冻干透析液，得到白色岩白菜素的偶联物；
所述的岩白菜素特异反应抗体是所述的岩白菜素的偶联物作为免疫原免疫新西兰大白兔获得。
2.如权利要求1所述的用途，其特征是：所述的岩白菜素与钥匙孔蓝蛋白的质量数比为1∶3。
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