[发明专利]芦荟苷的偶联物及其制备方法与应用在审
申请号: | 201611136272.X | 申请日: | 2016-12-07 |
公开(公告)号: | CN108164599A | 公开(公告)日: | 2018-06-15 |
发明(设计)人: | 郗日沫;邓川;尹永梅;孟萌;李小刚;龙浩 | 申请(专利权)人: | 南开大学 |
主分类号: | C07K14/795 | 分类号: | C07K14/795;C07K1/107;C07K16/44;C07K16/06 |
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地址: | 300350 天津*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 芦荟苷 偶联物 制备 钥匙孔 免疫原性 载体物质 蛋白 动物免疫系统产生抗体 酶联免疫检测试剂盒 免疫新西兰 蛋白分子 大白兔 抗血清 偶联 效价 应用 诱发 检测 | ||
1.一种芦荟苷的偶联物,由芦荟苷半抗原与产生免疫原性的载体物质偶联而成,所述载体物质为优选蛋白质,蛋白片段,合成多肽或半合成多肽。
2.如权利要求1所述的芦荟苷的偶联物,其中所述产生免疫原性的载体物质是钥匙孔蓝蛋白。
3.如权利要求2所述的芦荟苷的偶联物,其结构通式如(I)
其中,n为与一个钥匙孔蓝蛋白结合的芦荟苷的分子个数,KLH为钥匙孔蓝蛋白(Keyhole Limpet Hemocyanin),分子量范围是450KDa~13000KDa;
上述偶联物显示出如下物化特征:
(1)外观:桔黄色粉末状固体;
(2)紫外吸收光谱:374nm。
4.如权利要求1~3中任一项所述的芦荟苷的偶联物的制备方法,其特征是:将芦荟苷与产生免疫原性的载体物质连接起来,结合为具有诱发动物免疫系统产生抗体的偶联物,并保持该偶联物的生物活性不变。
5.如权利要求4所述的芦荟苷的偶联物的制备方法,由如下步骤完成:
(1)溶液A的制备:将10.0mg小分子化合物芦荟苷溶解于冰醋酸中,加入含有5.1mg高碘酸钠溶液0.5ml,室温下避光搅拌反应1h;
(2)溶液B的制备:将30mg KLH溶于10ml 0.05M碳酸盐缓冲溶液(CBS)中,备用;
(3)将溶液A逐滴加入溶液B中,在室温下避光搅拌反应6h,得溶液C;
(4)溶液C转移到透析袋中,用浓度为0.01M磷酸盐缓冲液(PBS)搅拌透析72h,之后更换用蒸馏水透析20~30h,每6h更换一次透析液,透析过程在4℃下进行;
(5)冻干透析液,得到桔黄色芦荟苷的偶联物。
6.如权利要求5所述的芦荟苷的偶联物的制备方法,其特征是:步骤(1)所述的芦荟苷与高碘酸钠摩尔比为1∶1。
7.如权利要求5所述的芦荟苷的偶联物的制备方法,其特征是:步骤(2)所述的芦荟苷与钥匙孔蓝蛋白的质量数比为1∶3。
8.权利要求1~3中任一项所述的芦荟苷的偶联物作为免疫原在制备芦荟苷特异反应抗体中的应用。
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