[发明专利]辅酶混合溶液及其制备方法有效
申请号: | 201611137950.4 | 申请日: | 2016-12-12 |
公开(公告)号: | CN106755210B | 公开(公告)日: | 2021-05-04 |
发明(设计)人: | 汪家权 | 申请(专利权)人: | 安徽翠鸟生物技术有限公司 |
主分类号: | C12P19/32 | 分类号: | C12P19/32;C12P19/36;C12R1/865 |
代理公司: | 苏州国卓知识产权代理有限公司 32331 | 代理人: | 马德龙 |
地址: | 247100 安徽省池州市*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 辅酶 混合 溶液 及其 制备 方法 | ||
1.辅酶混合溶液,其特征在于:所述辅酶混合溶液含ATP不少于50mg/ml、NAD不少于2mg/ml、NADP不少于5mg/ml,且含有NADH不少于0.5mg/mL、NADPH不少于0.2mg/mL、AMP不少于0.1mg/mL、ADP不少于0.1mg/mL;
该辅酶混合溶液的制备方法,依次包括以下步骤:
(1)取含水量不高于50%的酿酒酵母,超声波破碎30—120min得到破碎酵母;酿酒酵母采用新鲜啤酒酵母;
(2)向破碎酵母中按破碎酵母重量1.5—2.5%的重量添加腺苷,之后加热到35—40℃形成混合料;
(3)取硫酸镁、磷酸氢二钾、葡萄糖作为辅料,将辅料和混合料添加到水中,且采用磷酸调节pH 为6.5—7.0,加热到35—40℃后,得到第一混合液,其中,硫酸镁、磷酸氢二钾、葡萄糖的添加量分别为破碎酵母重量的0.15—0.25%、1.5—2.5%、4—6%,水的重量为破碎酵母重量的1—2倍;
(4)继续搅拌第一混合液30—60min后,向第一混合液中添加色氨酸,搅拌反应30—60min得到第二混合液,其中,色氨酸的添加量按腺苷重量的5—15%;
(5)静置第二混合液20—40min,然后向第二混合液中添加纯度不低于20%的NAD激酶继续反应25—35min得到第三混合液,其中,NAD激酶的添加量为腺苷重量的0.005—0.015%;
(6)静置第三混合液至少30min,然后用磷酸调pH 为2.5—3.5得第四混合液;
(7)对第四混合液进行离心,取上清液,上清液经过离子交换柱处理后,再依次采用低盐洗脱、高盐洗脱,收集全部溶液,接着经纳滤浓缩15—25倍,即得辅酶混合溶液。
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