[发明专利]一种鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白及应用有效

专利信息
申请号: 201611139299.4 申请日: 2016-12-12
公开(公告)号: CN106632621B 公开(公告)日: 2019-11-22
发明(设计)人: 董嘉文;李林林;袁建丰;孙敏华 申请(专利权)人: 广东省农业科学院动物卫生研究所
主分类号: C07K14/195 分类号: C07K14/195;C12N15/31;C12N15/70;G01N33/68;G01N33/569;C12R1/01;C12R1/19
代理公司: 44205 广州嘉权专利商标事务所有限公司 代理人: 许飞<国际申请>=<国际公布>=<进入国
地址: 510640 广*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 鸭疫里默氏 杆菌 血清 载体 受体 蛋白 srp 截断 重组 应用
【权利要求书】:

1.一种鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白,其特征在于:氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。

2.编码权利要求1所述的鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白的多核苷酸。

3.根据权利要求2所述的多核苷酸,其特征在于:核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。

4.权利要求1所述的鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP截断重组蛋白在制备检测鸭疫里默氏杆菌抗体试剂中的应用,其特征在于:鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP截断重组蛋白能与鸭疫里默氏杆菌抗体产生特异性反应。

5.一种制备权利要求1所述的鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白的方法,其步骤包括:

(1)将权利要求2或3所述的多核苷酸克隆入原核表达质粒pET43a(+)中,获得重组表达载体;

(2)将步骤(1)获得的重组表达载体转入大肠杆菌Rosetta工程菌株中,获得SRP截断重组蛋白Rosetta工程菌;

(3)将步骤(2)获得的SRP截断重组蛋白Rosetta工程菌按体积比1:50加入到含Amp的LB培养基中,培养至OD600为0.6~0.8,加入终浓度为0.5 mmol/L的IPTG,进行诱导培养;

(4)诱导培养结束后,离心收集菌体,加入PBS重悬菌体,于冰浴中进行超声裂解,离心,收集上清;

(5)将上清液进行纯化,获得权利要求1所述的截断重组蛋白,即鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:步骤(3)所述的IPTG诱导培养时间为3~5h。

7.根据权利要求5或6所述的方法,其特征在于:步骤(3)所述的IPTG诱导培养时间为5h。

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