[发明专利]一种鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白及应用

说明书

本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白及应用。该SRP截断重组蛋白能够与血清1型RA多克隆抗体产生特异性反应，可作为血清1型RA抗体检测的理想抗原。本发明的制备得到的RA血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白非全细菌，不存在散毒的危险，并且该蛋白原核表达时的可溶性增加，可有效降低下游大规模生产成本，适于工业化大规模生产，亦利于实验室疫苗研究。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，更具体地，涉及一种鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白及应用。

背景技术

鸭疫里默氏杆菌病是鸭、鹅、火鸡和其他鸟类的一种高致病性、接触性传染病之一，其病原体为鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer, RA)，主要侵害1～8 周龄（尤其2～3周龄）雏鸭、雏鹅及雏火鸡等。鸭疫里默氏杆菌病多呈急性或慢性败血症病程，主要以神经症状和纤维素性心包炎、肝周炎和气囊炎为特征，发病率90%以上，死亡率高达75%，耐过的病鸭常长成残次鸭或僵鸭，饲料转化率降低，生长发育迟缓，且由RA引起的输卵管炎严重影响鸭成年后产蛋率。因此，鸭疫里默氏杆菌病的广泛流行，给养鸭业带来严重的经济损失。

目前已成功研制出弱毒疫苗、灭活疫苗和亚单位疫苗来控制鸭疫里默氏杆菌病。由于RA 的血清型多而复杂，国际公认有21 个血清型，我国也存在10 多个血清型，且各血清型之间缺乏有效的交叉免疫保护，这给RA 的疫苗防治带来一定困难。比较有效的方法是针对当地主要流行血清型，选取相应菌株研制疫苗，以达到更有效的防治效果。

铁是生命系统所必需的分子，在脊椎动物体液中，铁绝大部分与转铁蛋白和乳铁蛋白结合在一起，致病菌要想在宿主体内建立感染，很大程度上依赖于其利用宿主铁复合物的能力，因此微生物的铁载体运输系统，是致病菌战胜宿主非特异性防御机制，并在宿主体内繁殖的关键。铁载体运输系统主要由铁载体、铁载体受体蛋白(Siderophore ReceptorProtein, SRP)组成，其中，SRP在细菌铁离子摄取机制中起着至关重要的作用，是细菌重要的毒力因子和潜在的疫苗靶分子。

RA抗体的检测是评价RA疫苗免疫效果及制定合理的免疫程序的关键。目前未见RA血清1型SRP研究和应用的相关研究报道。因此，研制一种易于制备，不存在散毒危险的新型RA抗原，对建立特异敏感的RA抗体检测方法进而防控RA具有非常重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种RA血清1型铁载体受体蛋白SRP及其编码核苷酸序列，目的之二在于提供一种RA血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白及其编码核苷酸序列，目的之三是提供RA血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白的制备方法及其在特异性检测RA抗体的应用。

本发明所采取的技术方案是：

鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

编码权利要求1所述的鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP的核苷酸序列，优选的，核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

一种鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白，氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。

编码鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白的核苷酸序列，优选的，核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。

一种鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP截断重组蛋白在制备检测鸭疫里默氏杆菌抗体试剂中的应用，鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP截断重组蛋白能与鸭疫里默氏杆菌抗体产生特异性反应。

一种鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白的方法，其步骤包括：