[发明专利]一种检测聚丙烯酰胺凝胶中DNA的银染试剂盒及其应用有效
申请号: | 201611144993.5 | 申请日: | 2016-12-13 |
公开(公告)号: | CN106596232B | 公开(公告)日: | 2019-04-30 |
发明(设计)人: | 郭培国;李荣华;刘文杰;夏岩石 | 申请(专利权)人: | 广州大学 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30;G01N27/447 |
代理公司: | 广州市天河庐阳专利事务所(普通合伙) 44244 | 代理人: | 胡济元;张祖华 |
地址: | 510006 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 聚丙烯酰胺 凝胶 dna 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种检测聚丙烯酰胺凝胶中DNA的银染试剂盒,该试剂盒包括:
试剂A:该试剂为水溶液,且每一升该水溶液中具有冰醋酸3~5mL、硝酸银1~3g和乙醇50~100mL;
试剂B:该试剂为水溶液,且每一升该水溶液中具有氯化钠0.5~1g、亚硫酸钠0.5~2.5g、碳酰肼0.1~0.3g、碳酸钠2~10g和葡萄糖5~10g;
试剂C:该试剂为水溶液,且每一升该水溶液中具有冰醋酸3~5mL。
2.一种获取DNA聚丙烯酰胺凝胶染色图片的方法,该方法包括以下步骤:
(1)取胶:取下PCR扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳后的胶板,轻轻揭去具凹槽的玻璃板,保留附着有聚丙烯酰胺凝胶的另一玻璃板;
(2)银染:将附着有聚丙烯酰胺凝胶的玻璃板放置在托盆中,并使其附着有聚丙烯酰胺凝胶的一面向上,然后加入权利要求1所述的试剂A浸泡;将托盆置于振荡器上,按每分钟30~60次的频率振荡8~15分钟后取出,用水冲洗3~5秒;
(3)显色:将银染后的玻璃板放置在托盆中,并使其附着有聚丙烯酰胺凝胶的一面向上,然后先加入权利要求1所述的试剂B,再将托盆置于振荡器上,按每分钟10~30次的频率振荡至能清晰观察出凝胶中DNA条带时取出;
(4)终止:将显色后的玻璃板放置在托盆中,并使其附着有聚丙烯酰胺凝胶的一面向上,然后先加入权利要求1所述的试剂C,再将托盆置于振荡器上,按每分钟30~60次的频率振荡1~2分钟取出,用水冲洗3~5秒;
(5)获取聚丙烯酰胺凝胶染色图片:将经步骤(4)处理后的玻璃板晾干,用扫描仪扫描便获得聚丙烯酰胺凝胶图片。
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